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    细菌的形态结构观察



    录入时间:2008-10-20 13:17:13 来源:青岛海博

            细菌的形态结构观察(革兰氏染色、芽孢染色、  荚膜染色)   
    革兰氏染色法原理
    由于细菌细胞壁结构的不同可将其分为革兰氏阴性和阳性
    芽孢染色原理
    芽孢壁比营养细胞的细胞壁结构复杂而且致密,透性低,着色和脱色较营养细胞难。采用碱性染料并在微火上加热,或延长染色时间,使菌体和芽孢同时染色后,用蒸馏水冲洗,脱去菌体颜色,保留芽孢的颜色。并用另一种对比鲜明的染料 使菌体着色。
    荚膜染色原理
    负染法,使背景与菌体之间形成一透明区。因荚膜薄,且易变形,所以不能用加热法固定。
    实验三-1、细菌的形态和结构观察(简单染色)
    一、目的要求
    观察细菌的菌落特征
    掌握简单染色法
    在油镜下观察细菌个体的形态
    学习环境中微生物的检查方法,并加深对微生物分布广泛性的认识
    二、基本原理
    形态观察主要包括群体的形态和个体的形态观察。
    细菌的基本形态主要分为球菌、杆菌、螺旋菌三大类,近年还发现星状和四方形细菌等。细菌形态受培养时间、培养基成分、浓度、培养温度、培养时间等发生变化。
    细菌菌落大多表面光滑湿润,有光泽,一般菌落较小,质地颜色均匀,同培养基结合不紧密。菌落特征与组成菌落的细胞结构、生长状况、排列方式、好气性和运动性直接相关。
    细菌个体微小,较透明,必须染色方可呈现。根据细菌个体形态观察的不同要求,可将染色分为3种类型:简单染色、鉴别染色、特殊染色。
    简单染色法原理
    细菌在中性的环境中带负电荷,用碱性染料(解离时带正电荷)如美兰、结晶紫等进行染色。
    实验三-2:放线菌的形态结构观察
    一、目的要求
    掌握放线菌形态结构观察的方法
    观察放线菌的菌落特征、个体形态及其繁殖方式。
    二、原理
    放线菌菌落在培养基上着生牢固,与基质结合紧密,难以用接种针挑取。
    放线菌细胞一般呈分枝无隔的丝状,菌丝体分为在培养基内部的基内菌丝和伸出培养基表面的气生菌丝。气生菌丝上部分化成孢子丝,呈螺旋状、波浪状或分枝状。菌丝呈各种颜色,有的能分泌水溶性色素到培养基内。孢子丝长出孢子,孢子形状各异。由于孢子的存在使菌落表面呈干粉状。
    三、实验内容
    (一)菌落形态观察及菌苔特征的观察
    观察放线菌菌落表面形状、大小、颜色、边缘以及有无色素分泌;并用接种环挑取菌落,注意在培养基上的着生的紧密情况。区别基内菌丝、气生菌丝及孢子丝的着生部位。
    (二)个体形态特征观察
    可直接观察,也可置于载片上观察。注意放线菌菌丝直径的大小,孢子丝的形状。
    (三)孢子形态观察
    用印片法
    (四)用插片法观察放线菌形态
    实验三-3:霉菌的形态观察
    一、目的要求
    观察霉菌菌落特征
    掌握霉菌的制片方法
    观察霉菌个体形态及各种无性孢子及有性孢子的形态
    二、基本原理
    霉菌是由交织在一起的菌丝体构成。菌丝呈管状,有的有横隔将菌丝分割为多细胞(如青霉、曲霉),有的菌丝没有横隔(如毛霉、根霉)。菌丝直径比一般细菌和放线菌菌丝大几倍到几十倍。菌落形态较大,质地疏松,颜色各异,有丝状、绒毛状或蜘蛛网状的菌丝体。
    将菌丝体放在水中易变形,将其置于乳酸石炭酸溶液中,保持菌丝体原形。
       

     

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