增菌培养

第一步增菌培养：用UVM肉汤，30±2℃培养22±2h

第二步增菌培养：用Fraser肉汤，从UVM增菌肉汤中取0.1±0.02ml培养液加入10±0.5ml Fraser肉汤中， 35±2℃培养24-48小时。

选择性分离培养

   取0.1ml 30±2℃培养22±2h UVM肉汤培养物，划线接种到MOX平板上， 35±2℃培养24-48小时，检查有无黑色菌落，并菌落外围有黑色环。 Fraser肉汤培养26±2小时，出现明显黑色，取0.1±0.02ml培养物接种到MOX平板上35±2℃至少培养24小时，若Fraser肉汤培养26±2小时，没有出现明显黑色，继续培养至48±2小时，出现明显黑色，取0.1±0.02ml培养物接种到MOX平板上35±2℃至少培养24小时。若培养48小时，仍没有出现明显黑色，并在XOA上没有可疑菌落，则此样品为单增李斯特氏菌阴性。

从XOA平板上挑取至少20个可疑菌落，接种到HL琼脂平板上， 35±2℃培养18-26小时，在暗光线下检查是否有小的β溶血环。如果有，挑取单菌落进行确证试验。如果没有，此样品为单增李斯特氏菌阴性。

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