已培养的营养琼脂斜面上生长的菌苔，进行生化试验，即β-半乳

糖苷酶，尿素，赖氨酸脱羧酶，鸟氨酸脱羧酶以及水杨苷和七叶苷的分解试验。除宋内氏志贺氏菌、鲍氏志贺氏菌13 型的鸟氨酸阳性；宋内氏菌和痢疾志贺氏菌1 型，鲍氏志贺氏菌13 型的β-半乳糖苷酶为阳性以外，其余生化试验志贺氏菌属的培养物均为阴性结果。另外由于福氏志贺氏菌6 型的生化特性和痢疾志贺氏菌或鲍氏志贺氏菌相似，必要时还需加做靛基质、甘露醇、棉子糖、甘油试验，也可做革兰氏染色检查和氧化酶试验，应为氧化酶阴性的革兰氏阴性杆菌。生化反应不符合的菌株，即使能与某种志贺氏菌分型血清发生凝集，仍不得判定为志贺氏菌属。

附加生化实验

由于某些不活泼的大肠埃希氏菌（anaerogenic E.coil.）、A-D（Alkalescens-Disparbiotypes 碱性-异型）菌的部分生化特征与志贺氏菌相似，并能与某种志贺氏菌分型血清发生凝集；因此前面生化实验符合志贺氏菌属生化特性的培养物还需另加葡萄糖胺、西蒙氏柠檬酸盐、粘液酸盐试验(36 ℃培养24 h～48 h)。

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