将测试片的透明面朝上置于培养箱内,堆叠片数不超过20片,在36C ± 1C下培养24±2 h。培养24±2 h后,如果测试片上没有菌落生长或菌落全部是典型紫红色,检验完毕;如果培养24±2 h时测试片上出现除典型紫红色以外颜色的菌落,如黑色、蓝绿色等,需使用确认反应片作进一步确认。
确认反应片并非每个检测都要使用,只有当24h培养后测试片上出现除典型紫红色以外颜色菌落时才用;
测试片的培养时间不要超过26h。
当需要使用确认反应片时,将上层膜掀起,将确认反应片置入测试片的培养范围内,再将上层膜放下覆盖在确认反应片上,用手指以滑动的方式轻轻将测试片与确认反应片压紧,包括确认反应片的边缘,此步骤可使测试片与确认反应片紧密接触并除去气泡,最后把插入确认反应片的测试片放在36C ± 1C的培养箱内培养1-3 h。
插入确认反应片后培养时间不要超过3h
菌落计数: 到培养时间应立即计数,可目视、或用标准菌落计数器来计数,放大镜可辅助计数;
1)选取菌落数在15-150之间的测试片作为计数标准。
2)选择菌落数在15-150之间的稀释度,乘以稀释倍数报告之;
3)如果所有稀释度测试片上的菌落数都小于15, 则计数稀释度最低的测试片上的菌落数乘以稀释倍数报告之;
4)如果所有稀释度的测试片上均无菌落生长,则以(<)1乘以最低稀释倍数报告之;
5)如果最高稀释度的菌落数大于150个时,计数最高稀释度的测试片上的菌落数乘以稀释倍数报告之,计数菌落数大于150个的测试片时,可计数一个或两个具有代表性的方格内的菌落数,换算成单个方格内的菌落数后乘以30即为测试片上估算的金黄色葡萄球菌数 (圆形生长面积为30 cm2)。最终菌落浓度的单位以”cfu/g (mL)”表示
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