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菌落总数测定平板接种与培养



录入时间:2014-9-22 11:47:41 来源:银河澳门官网入口

1.根据食品卫生标准要求和对样品污染情况的估计,选择2~3个稀释度。加入样品时要注意外来的污染。

2.培养基倾注的温度与厚度是实验正确与否的关键。(倾注的温度:一般45℃左右,温度过高会造成已受损伤的菌细胞死亡。厚度:直径9cm的平皿一般要求15~20mL培养基,若培养基太薄,在培养过程中可能因水分蒸发而影响细菌的生长)。

3.为防止细菌增殖及平板底部产生片状菌落,在加入样液后,应在20min内倾注培养基。检样与培养基混匀时,可先向一个方向旋转,然后再向相反方向旋转。旋转中应防止混合物溅到皿边的上方。

4.培养基凝固后,应尽快将平皿翻转培养,保持琼脂表面干燥,避免菌落蔓延生长,影响计数。

5.为控制污染,在实验过程中,应在工作台上打开一块琼脂平板,其暴露时间应与检样从制备、稀释到加入平皿时所暴露的最长时间相当,然后与检样一同培养,以了解检样在操作过程中有无受到来自外界的污染。

6.培养温度:

   每种不同样品中的细菌都有一定的生理特性,培养时应用不同的营养条件及生理条件可能得出不同的结果,因而应根据检测标准的要求选择适当的培养温度和培养时间。

食品:36±1℃, 48±2h。

饮用水:36±1℃, 48h。

水产品:30±1℃, 72±3h。 (36℃培养和30℃培养结果差别较大,同样水产品48h结果和72h也有差别。)

7.对照试验:

检样的稀释液中往往带有食品颗粒,在这种情况下,为避免与细菌菌落混淆,可作同一稀释度检样对照,不经培养,置4℃环境放置,在计数时用于对照。

可选用TTC平板计数琼脂做培养基。一般加入量0.5%~1.0%浓度的TTC,100mL培养基中加入1mL。

 


 

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