细菌生化试验原理
各种细菌所具有的酶系统不尽相同,对营养基质的分解能力也不一样,因而代谢产物或多或少地各有区别,可供鉴别细菌之用。用生化试验的方法检测细菌对各种基质的代谢作用及其代谢产物,从而鉴别细菌的种属,称之为细菌的生化反应。
糖发酵试验
微生物能在有氧或无氧条件下代谢各种糖或醇能力,从而进行各种细菌的鉴别。
靛基质(吲哚)试验原理
将被检菌接种到蛋白胨培养基中,36±1℃培养18h-24h后,沿试管壁滴加数滴吲哚试剂于培养物液面,观察结果。出现红色者为阳性,出现黄色
者为阴性。大肠杆菌能分解蛋白质中的色氨酸,产生靛基质(吲哚),靛基质与对二甲基氨基苯甲醛结合,形成玫瑰色靛基质(红色化合物),为阳性结果。
赖氨酸脱酶试验
将被检菌接种到赖氨酸脱羧酶肉汤和氨基酸脱羧酶对照生化管中,于36±1℃培养18h-24h后,观察结果。
赖氨酸脱羧酶肉汤和氨基酸脱羧酶对照均变黄为阴性,赖氨酸脱羧酶肉汤变紫,氨基酸脱羧酶对照变黄为阳性。
大肠杆菌赖氨酸试验为阴性,沙门氏菌为阳性。
细菌甲基红(Methylred)试验(该试验简称MR试验) 大肠杆菌等分解葡萄糖产生丙酮酸,丙酮酸再被分解,产生甲酸、乙酸、乳酸等,使培养基的pH降低到4.2以下,这时若加甲基红指示剂呈现红色。因甲基红指示剂变色范围是pH4.4(红色)~pH6.2(黄色)。产气杆菌,分解葡萄糖产生丙酮酸,但很快将丙酮酸脱羧,转化成醇等物,则培养基的pH仍在6.2以上,故此时加入甲基红指示剂,呈现黄色。
细菌VP试验原理
细菌在葡萄糖代谢中生成丙酮酸,从丙酮酸开始、随细菌种类不同而有多种分解途径,有的使丙酮酸进一步分解,生成甲酸、乙酸、乳酸、二氢和氧化碳等最终产物,有的可使丙酮酸脱羧变为中性最终产物乙酰甲基醇。在碱性条件下,可被空气中氧气氧化为丁二酮、丁二酮与蛋白胨中精氨酸所含的胍基起作用,生成红色化合物,即V-P试验阳性。
试剂组成:A液:a-萘酚 B液:40%氢氧化钾溶液
试验时先加A液,再加B液,若加反可能会出现假阳性。
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