氧化酶试验:挑选纯培养的单个菌落进行氧化酶试验,创伤弧菌为氧化酶阳性。
涂片镜检:将可疑菌落涂片,进行革兰氏染色,镜检观察形态。创伤弧菌为革兰氏阴性,呈棒状或弧状。
挑取纯培养的单个可疑菌落,转种3%氯化钠三糖铁琼脂斜面并穿刺底层,36 ℃±1 ℃培养24 h观察结果。创伤弧菌在3%氯化钠三糖铁琼脂中的反应为底层变黄不变黑,无气泡,斜面颜色不变或红色加深,偶尔斜面变黄。
V-P试验:以接种针由3%氯化钠三糖铁琼脂斜面挑取少许培养物穿刺3%氯化钠MR-VP培养基,36℃±1 ℃培养24 h,在加V-P试剂前应先观察动力。沿穿刺线周围呈扩散性生长为动力阳性。
嗜盐性试验:挑取纯培养的单个可疑菌落,分别接种于不同氯化钠浓度的胰胨水,36 ℃±1 ℃培养24 h,观察液体混浊情况。创伤弧菌在无氯化钠、8%氯化钠和10%氯化钠的胰胨水中不生长,在6%氯化钠的胰胨水中生长旺盛。
确定鉴定
生化试验:取纯培养物分别接种含3%氯化钠的赖氨酸培养基,36 ℃±1 ℃培养24 h~48 h后观察结果。隔夜培养物进行ONPG试验。
API 20E生化鉴定试剂盒:刮取3%氯化钠胰蛋白胨大豆琼脂平板上的单个菌落,用3%氯化钠溶液制备成浊度适当的细菌悬浮液,使用API 20E生化鉴定试剂盒鉴定。
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