液体培养基的定量测定方法
选择质控菌株和参考培养基
目标菌:用少量目标菌的培养物(10-100CFU),接种测试肉汤和参考肉汤,混匀
非目标菌:用大量非目标菌培养物(大于1000CFU)接种测试肉汤和参考肉汤,混匀
在适宜条件下培养一定时间
从每一种肉汤中移取一定量的菌液(必要时可取原菌液的稀释液)涂布于非选择性琼脂平板上
培养后,对目标菌和非目标菌分别进行计数,并根据不同的测试目的进行计算和解释
液体培养基的定量测定方法
——评价:
目标菌的PR不应小于0.1(即测试培养基和参考培养基菌落总数的差别不超过一个数量级)
非目标菌的SF值至少应达到2液体培养基的半定量测定方法
混合菌的接种:在测试肉汤中接种10CFU-100CFU的目标菌和>1000CFU的非目标菌,混匀
非目标菌的接种:在测试肉汤中接种>1000CFU的非目标菌,混匀
在规定的时间和温度下进行培养
用3mm接种环取一环混合菌培养液划线接种到特定目标菌选择性平板上,取一环非目标菌培养液划线接种到非选择性平板上
将两种平板在规定条件下培养
结果判定:选择性平板上有至少10个目标菌生长,表示测试肉汤的生长率良好;非选择性平板上没有菌生长或少于10个菌,则表示测试肉汤的选择性良好
液体培养基的半定量测定方法
混合菌的接种:在测试肉汤中接种10CFU-100CFU的目标菌和>1000CFU的非目标菌,混匀
非目标菌的接种:在测试肉汤中接种>1000CFU的非目标菌,混匀
在规定的时间和温度下进行培养
用3mm接种环取一环混合菌培养液划线接种到特定目标菌选择性平板上,取一环非目标菌培养液划线接种到非选择性平板上
将两种平板在规定条件下培养
结果判定:选择性平板上有至少10个目标菌生长,表示测试肉汤的生长率良好;非选择性平板上没有菌生长或少于10个菌,则表示测试肉汤的选择性良好
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