取增菌后或筛选试验阳性的mEC+n肉汤,分别划线或适当稀释后取0.1mL涂布接种于CT-SMAC平板和改良CHROMagar O157显色琼脂平板上,于36±1℃培养18~24h,观察菌落。必要时将混合菌落分纯。在CT-SMAC平板上,发酵山梨醇的菌落为红色;典型菌落为不发酵山梨醇的圆形、光滑、较小的无色菌落,中心呈现较暗的灰褐色,用接种针挑起时无拉丝现象。在改良CHROMagar O157显色琼脂平板上为圆形、较小的菌落,中心呈淡紫色-紫红色,边缘无色或浅灰色。
CCP:
增菌后的肉汤在取样前,应轻微摇晃混匀。
划线时应多次往返,保证分离效果。
涂布时应适当稀释。
注意区分典型菌落,必要十分纯。大部分非O157 E.coli发酵山梨醇,仍有6%不发酵山梨醇,它们与摩根氏菌和哈夫尼亚菌一样在TC-SMAC上表现为与O157相同的菌落特征。
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