选择2~3个适宜的连续稀释度的样品匀液(液体样品可以选择原液),每个稀释度分别吸取0.1mL接种到MYP琼脂平板上,每稀释度接种两个MYP琼脂平板。用无菌L棒涂布整个平板,注意不要触及平板边缘。使用前,如MYP琼脂平板表面有水珠,可放在25℃ ~ 50℃的培养箱里干燥,直到平板表面的水珠消失。
涂布后,将平板置于30 ℃±1 ℃培养24 h±2 h后(原标准为36 ℃±1 ℃培养12 h~20 h) ,选取具有15个~150个典型或可疑蜡样芽胞杆菌菌落的平板,进行计数。并计算同一稀释度两个平板的平均菌落数。如果菌落不典型,可继续培养18 h~24 h再计数。
计数后,从每个平板选取至少5个已计数的典型或可疑菌落,如果一个平板上少于5个典型或可疑菌落,则取所有典型或可疑菌落,分别划线接种于营养琼脂平板, 30 ℃±1 ℃培养24 h±2 h,进行确证实验。
根据确证实验确定为蜡样芽胞杆菌的菌落数,按比例计算出该平板上蜡样芽胞杆菌菌落数,然后计算同一稀释度两个平板的平均蜡样芽胞杆菌数,再乘其稀释倍数,再乘以10,即得每g(mL)样品中蜡样芽胞杆菌数并作出报告。
上一篇:蜡样芽胞杆菌定性检测