1、划线获得单个菌落的方法。

        划不出单个菌落的原因：

（1）       平板上有过多的水分

（2）       划线时接种环未经反复灼烧

（3）       多区划线，三区或四区划线

                         四区划线方法

2、  涂布和倾注的区别：

涂布利于观察，但由于涂布棒上会带有少量的菌液，影响计数的准确性。

涂布更为准确，但不利于观察菌落的状态。

3、  培养基配制时应注意的问题

（1）灭菌温度要严格控制，按照要求灭菌，尤其含糖量较高的培养基温度不应太高，过高会导致糖分焦化，影响质量。

（2）琼脂培养基不能反复溶化。反复溶化会破坏培养基中的营养成分。

（3）培养基不能反复灭菌，反复灭菌也会导致营养成分的破坏。

（4）含琼脂的培养基灭菌后，要摇匀。

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