取经30 ℃±1 ℃培养24 h±2 h并于室温放置3 d~4 d的营养琼脂培养物少许于载玻片上,滴加蒸馏水混匀并涂成薄膜。经自然干燥,微火固定后,加甲醇作用30 s后倾去,再通过火焰干燥,于载玻片上滴满0.5%碱性复红,放火焰上加热(微见蒸气,勿使染液沸腾)持续1 min~2 min,移去火焰,再更换染色液再次加温染色30 s,倾去染液用洁净自来水彻底清洗、晾干后镜检。
观察有无游离芽胞(浅红色)和染成深红色的菱形、正方形或其它形状的蛋白结晶体。如发现游离芽胞形成的不丰富,应将培养物置室温2 d~3 d再行检查。放置3d~4d以上的苏云金芽胞杆菌培养物有大量的结晶体,但是只有在芽胞裂解通过上述染色方法才能见到。然而,除非见到芽胞,否则培养物应在室温继续放置几天以重新检查毒素晶体。其它芽胞杆菌不产生蛋白质毒素晶体。
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