定量检测
基于“三管”MPN 法,取检样25 g(mL)加入装有225 mL LB1 增菌液中,均质制成1:10 稀释液,用灭菌吸管吸取1:10 稀释液1 mL,注入含有9 mL LB1 增菌液的试管内,振摇试管混匀,制备1:100 的稀释液。
另取1 mL 灭菌吸管,按上条操作依次制备10 倍递增稀释液,每递增稀释一次,换用1 支1 mL 灭菌吸管。
根据对检样污染情况的估计,选择三个连续的适宜稀释度,每个稀释度接种3 支含有9 mL LB1 增菌液的试管,每管接种1 mL。于30 ℃±1 ℃培养24h,移取1 mL,转种于9 mL LB2 增菌液内,于30 ℃±1 ℃培养18 h-24 h。
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