溶血试验
挑取纯培养的单个可疑菌落接种于TSSB 琼脂平板上，30 ℃±1 ℃培养24h±2 h。蜡样芽胞杆菌菌落为浅灰色，不透明，似白色毛玻璃状，有草绿色溶血环或完全溶血环。苏云金芽胞杆菌和蕈状芽胞杆菌呈现弱的溶血现象，而多数炭疽芽胞杆菌为不溶血，巨大芽胞杆菌为不溶血。
溶菌酶耐性试验
用接种环取纯菌悬液一环，接种于溶菌酶肉汤中，36 ℃±1 ℃培养24 h。蜡样芽胞杆菌在本培养基(含0.001 ％溶菌酶)中能生长。如出现阴性反应，应继续培养24 h。巨大芽胞杆菌不生长。
根状生长试验
挑取单个可疑菌落按间隔0.5cm 左右距离划平行直线于营养琼脂平板上，30 ℃±1 ℃培养24 h±2 h。蕈状芽胞杆菌形成根状生长的特征。蜡样芽胞杆菌菌株不具形成根状生长的特征。
