定量检测
基于“三管”MPN 法,取检样25g(mL)加入装有225mL 缓冲蛋白胨水中,均质制成1:10 稀释液,用灭菌吸管吸取1:10 稀释液1 mL,注入含9mLBPW的试管内,振摇试管混匀,制备1:100 的稀释液。
另取1 mL 灭菌吸管,按上条操作依次制备10 倍递增稀释液,每递增稀释一次,换用1 支1 mL 灭菌吸管。
根据对检样污染情况的估计,选择三个连续的适宜稀释度,每个稀释度接种3 支含有9mL BPW 的试管,每管接种1 mL。置36 ℃±1 ℃恒温箱内,培养8 h~18 h。分别移取1mL 转种于10mLTTB,42℃±1℃培养18h~24h。
分离、鉴定方法同第一法。
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