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培养基的加热灭菌



录入时间:2014-1-16 9:52:20 来源:银河澳门官网入口

      培养基的加热灭菌

在加热灭菌前,培养基(尤其是琼脂培养基)的成分应边搅拌边溶解于水中。

正如在2.3中所提到的,高压灭菌的时间取决于培养基中微生物的含量,容器的大 小,每个容器中物质的体积和灭菌锅内容器的空间。在制备培养基时,由于污染的微生物的含量通常很低,所以影响高压时间的主要变量取决于上述其他的几个因素。灭菌时间 通常要在121℃下保持15~20min,这个时间从中心温度达到121℃开始计算。可以将热 电偶放人灭菌锅内部中心进行测定。lOOmL的瓶子或烧杯单独放在髙压锅中达到121℃大约需要10min,如果多个瓶子紧挨着放满灭菌锅内的丝悬筐中,瓶子中的物质需要 20min才能达到121℃如果培养基或稀释液的体积很大时,则需要更长的时间;例如单 独使用1L的瓶子温度达到121℃时需要20min,如果许多这样的瓶子紧挨着放满灭菌锅 内的丝悬筐中,则中心温度要达到121℃需要30mm或更长的时间。很明显,为了达到灭 菌的目的,对培养基和稀释液进行高压灭菌时,惟一正确的方法是将热电偶放入灭菌锅中测定。

当培养基分装在大的容器(1L或更大时)中时,可能会因为延长灭菌加热时间而造成 热降解。因此在高压灭菌前,最好先将培养基成分溶解后分装到较小的容器中(如装入 100ml带螺帽的浅试剂瓶中)。


 

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