6.2实验室使用商品化培养基和试剂的质量控制的测试方法
6.2.1 非选择性分离和计数固体培养基的半定量测试方法
6.2.1.1平板的制备与保存
按照6.1.1.1中要求进行。
6.2.1.2工作菌悬液的制备
将标准储备菌株接种到非选择性肉汤培养过夜作为工作菌悬液。
6.2.1.3 接种
用1 μL接种环进行平板划线（如图2)。A区用接种环按0.5 cm的间隔划4条平行线，按同样的方法 在B区和C区划线，最后在D区内划一条连续的曲线。同时接种两个平板，划线时可在培养基下面放一 个模板图，并按标准规定的培养条件培养平板。
图2目标菌半定量划线法接种模式图
操作时用接种环而不用接种针，接种环应完全浸入培养基中。取一满环接种物，将接种环接触容 器边缘3次可去除多余的液体。划线时，接种环与琼脂平面的角度应为20°〜30°。接种环压在琼脂表 面的压力和划线速度前后一致，整个划线应快速连续，移取液体培养物时应将接种环伸入培养液下部 分以防止环上产生气泡或泡沫。
通常用同一个接种环对A〜D区进行划线，操作过程不需要对接种环灭菌。但为了得到低生长指数 G，在接种不同部分时应更换接种环或对其灭菌。
6.2.1.4 计算
培养后，评价菌落的形状、大小和生长密度，并计算生长指数G每条有比较稠密菌落生长的划 线则G为1，每个培养皿上G最大为16如果仅一半的线有稠密菌落生长，则G为0.5如果划线上没有 菌落生长、生长量少于划线的一半或菌落生长微弱，则G为0记录每个平板的得分总和便得到G如， 菌落在A区和B区全部生长，而在C区有一半线生长，则G为10
6.2.1.5 结果解释
目标菌在培养基上应呈现典型的生长。目标菌的生长指数G大于或等于6时，培养基可以接受。非选择培养基的G值通常较高。
6.2.2选择性分离和计数固体培养基的半定量测试方法
6.2.2. 1目标菌半定量测试方法
按照6.2.1中要求进行。
6.2.2.2非目标菌(选择性）半定量测试方法
按照6.1.2.2中要求进行。
6.2.3非选择性增菌培养基、选择性增菌培养基和选择性液体计数培养基的定性测试方法
6.2.3.1 培养基的制备
将培养基分装试管，每管10 mL
6.2.3.2 工作菌悬液的制备
将标准储备菌株接种到非选择性肉汤培养过夜，进行10倍系列稀释至10-3，或采用其他方法,制备 成105 CFU/mL〜107 CFU/mL的菌悬液作为工作菌悬液。
6.2.3.3 接种
用1μL接种环取一环工作菌悬液直接接种到用于性能测试的液体培养基中，按适合的培养时间和 温度进行培养。
6.2.3.4 结果解释
用目测的浊度值(如0〜2)评估培养基：
—0表示无混浊；
—1表示很轻微的混浊；
—2表示严重的混浊。
目标菌的浊度值应为2，非目标菌的浊度值应为0或1
有时可以观察到微生物生长后聚集成细胞团，沉积在试管或瓶子底部，发生这种情况时，小心振 荡试管后再进行观察。选择性液体计数培养基目标菌应有产气现象，非目标菌无产气现象。
6.2.4悬浮培养基和运输培养基的定性测试方法
6.2.4.1 培养基的制备
6.2.4.2 按照6.1.6.1中要求进行。
6.2.4.3 工作菌悬液的制备
将标准储备菌株接种到非选择性肉汤培养过夜作为工作菌悬液。
6.2.4.4 接种
用1 μL接种环取一环工作菌悬液直接接种到装有待测培养基的试管中,混匀后，立即用10μL接种 环取一环工作菌培养物划平行线接种平板，按标准方法中规定的培养时间和温度培养；
剩余已接种菌液的待测培养基置20~25℃放置45 min后，再用10 μL接种环取一环工作菌培养 物划平行线接种平板，按标准方法中规定的培养时间和温度培养。如保存条件有特殊要求的待测培养 基，参照附录G培养基质量控制标准要求放置或培养后再进行划线接种。
6.2.4.5 结果观察与解释
接种前后平板上目标菌的生长情况应均为良好。
6.2.5 Mueller-Hinton血琼脂的测试方法
按照6.1.7中要求进行。
6.2.6 鉴定培养基的测试方法
按照6.1.8中要求进行。
6.2.7 实验试剂的测试方法
按照6.1.9中要求进行。
