卵磷脂酶的测定
菌体如存在有卵磷脂酶,就能使卵磷脂分解生成脂肪和水溶性的磷酸胆碱。
接种与观察结果:将测试菌的菌液,环接在有卵黄的试管和不加卵黄的对照管中,适温培养1、3或5天观察。假若与对照管相比较,在卵黄胰胨液中或表面,形成白色沉淀者,则为阳性反应,表示卵磷脂被分解,生成脂肪和水溶性的磷酸胆碱,说明有卵磷酶的存在。
另一种方法:
以无菌操作取出卵黄,放入灭菌的三角瓶中,加相当于等量的生理盐水摇匀后,取10mL卵黄液加入到溶化的约50-55℃的200mL肉汁胨琼脂培养基中,混合均匀后倒入培养皿,制成卵黄平板,过夜后即可使用。
接种与观察结果:将测试菌点接在卵黄平板上,每皿可分散点接4-5株菌、(芽孢杆菌以点接1-2株菌为宜)以不影响结果观察为度,如测试厌氧菌,则须在上面加盖无菌的盖玻片。每株菌至少重复点接两皿。适温培养1-2d观察,在菌落周围形成乳白色混浊环,表示卵磷脂被分解,生成脂肪,说明该菌株有卵磷脂酶存在。
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