用Charlett改良的Newman染色剂对Breed涂片染色，镜检,检测 体细胞和/或细菌。也可用改良的(无碱件品红的)Newman染色剂染色

两种国际认可的镜检方法如下：

a. 电子分子汁数板(如Coulter计数板）

b. 先用溴化乙啶着色，然后用荧光适微镜进行自动细胞计数

c. 在血琼脂平板上划线，筛选引发乳腺炎的链球菌菌落。若菌落不易判定，可用 Edward七叶苷结晶紫血琼脂代替。

若检测到引发乳腺炎的病原体或诊断出有乳腺炎临床或亚临床症状时，用抗生素药 敏实验确认。

Whiteside或加利福尼亚快速间接测试法。因菌体核酸释放导致碱或表面活性剂 增加，引起牛奶黏度增强，以此判断牛奶中细菌的数n。这些测试方法的优点是能在农场 进行现场测试。

 Breed细胞涂片计数

实验室诊断乳腺炎最有效的方法之一是Breed氏涂片技 术与Newman或类似的染色技术结合检测细胞总量。健康奶牛的奶中也含有一 些细胞，主要是上皮细胞和少量的白细胞，患有乳腺炎的牛产的奶，因乳房发炎会导致白 细胞数量的剧增。在泌乳早期、晚期的奶中，细胞数量也会有所增加，但这往往是因为上 皮细胞的数量增加而引起的。这些细胞可用特殊染 色技术加以区分。但是,Blackburn和其同事认为除泌乳晚期奶之外，细 胞数最的不同对乳腺炎的诊断无特殊意义。当用1/4样品诊断时，一个载玻片上可同时 制备同一牛乳中的四个涂片样品。

下面方法适用于待加热生乳卫生质量的评估：

从健康牛的乳房无菌挤出的生奶，每毫升含有几百-几千个细菌，大多是微球菌属和 乳类口喉棒状杆菌。非无菌挤奶通常会将许多微生物从外界(如从乳房衷面，牛粪、土壤、 垫草、饲料）带人优质奶中。奶挤出之后到加热处理之前有一段延缓期，为细菌的生长 和繁殖提供了有利条件。奶中微生物的种类和数量取决于存储温度，若奶被挤出后很快 冷却并冷藏保存，假单胞菌属的嗜冷、嗜温菌及某些芽孢仟菌、杆菌会生长繁殖；若延缓期 在冷却之前，则乳酸菌会大量繁殖。

从农场抽取的冷藏生奶样品，30℃下的需氧嗜温细菌数量应小于104个/ml;而乳品 加丁厂大量冷藏的原料奶，30℃下生长的需氧嗜温菌数应小于105个/mL多数情况 下生奶的检测（如显微镜检查)主要是针对乳腺炎进行的，最好对农场奶中逐一抽样进行 检验。细菌计数等检测项目是用于生产和储存卫生质量的评估。

乳腺炎的检查

多数用于牛乳腺炎诊断的实验室方法都能用于检测牛奶的品质变化，这种品质变化 往往是由于牛奶受到微生物的污染所造成的。同时细菌培养法也被尝试着用于病原菌的 分离,这种方法也能用于抗生素的药敏实验。在抽取牛奶样品进行细菌检测前要先对挤 奶者的手和牛的乳房进行清洁和消毒，这一点非常重要。将开始挤出的奶弃掉，中段奶直 接挤人一个无菌样品瓶。初步普查的牛群，可分别取1/4样品，混合后进行详细的调查，应 从可疑的群体中抽取1/4样品，单独检测。当牛或奶呈现亚临床症状(隐性感染）即无肉 眼可见的异常现象时，实验室检测尤为重要

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