乳球菌和链球菌
使用中性红白垩乳糖琼脂培养基,可以在不同的培养温度下分离不同菌种。例如 30℃下以从酸奶和黄油奶培养物中分离乳球菌,37〜43℃可以从酸奶屮分离嗜热链球菌 后者的分离也可用L - S鉴别培养基)c
在鉴别培养基中加入1:2000的醋酸铊能很好的抑制大肠菌群选择忭分离革兰氏阳性菌。例如能从生酸奶中分离链球菌。
在中性红白垩乳糖琼脂培养基上,乳球菌、链球菌的产酸菌落很小,呈深红色,酸度增 加溶解了培养基中的白垩周围出现了清晰环带。
用接种针挑选可疑乳球菌和链球菌,穿刺于石蕊乳培养基,进行传代培养; 也可制备涂片,革兰氏染色后镜检,以证实是否存在革兰氏阳性球菌石蕊牛奶培养基在 30℃或37℃培养至产酸,重新检测。在固体培养基上重新划线能得到纯菌种
乳酸杆菌
用Kogosa琼脂等选择性培养基,冉覆盖一层5mL熔化的琼脂可以分离 乳酸杆菌。根据所分离的乳酸杆菌的不同特性确定其培养温度。低温下生长良好的链杆 菌属和乳杆菌属细菌(例如干酪乳杆菌),要求在30℃培养。乳杆菌属中的嗜热杆菌亚属 (例如嗜酸乳杆菌和保加利亚乳杆菌)能在较高温度生长,需在37℃培养。用L-S鉴别 培养棊可以检测酸奶中的德氏乳杆菌,也可从嗜热链球菌中区分出该菌。
选取单个菌落镜检,将革兰氏阳性杆菌(可疑的乳杆菌)的菌落种到石蕊牛奶培养基中,如前文所述进行再次培养,长出后应重新检测培养物:如需要进一步鉴别,必须先在固体培养基上将菌种纯化。
酵母菌
酵母菌的选择应使用高酸度的选择性培养基以抑制其他菌种的生长,例如可使用麦 芽浸膏琼脂或Davis酵母盐琼脂,两者pH均为3.5。于22℃或25℃培养3 -5d。挑取单个酵母菌菌落接种到麦芽膏 琼脂斜面,纯化后做进一步的研究。将纯菌株接种到含有葡萄糖、半乳糖和乳糖等一系列 糖发酵培养基上分离后,可以检测菌株的发酵能力。
污染菌株的检测
用平板划线法和适当的选择性培养基可以检测发酵菌种中的污染菌,对照检索表进 行菌种的纯化和分离。
值得注意的是工厂卫生标准巾对大肠菌群的检测应限于样品生产出后的Mh内进 行。因为在储存期间大肠菌群会逐渐死亡—酵母菌娃潜在的腐生微生物。数量少时,用 多管技术和pH为3.5的Davis酵母盐肉汤进行选择性培养计数(酵母菌需用显微镜加以 证实并检查管中是否产气。
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