国际食品微生物专业委员会(ICMSF,1978)建议在检测低污染样品时,选用磷酸盐 缓冲蛋白胨水或胰蛋白胨大豆肉汤(含牛胆汁和亮绿,321〜322页)进行前增菌,然后再 用肠道菌增菌肉汤进行选择性增菌。再接种紫红胆盐葡萄糖琼脂选择可疑菌株。发酵葡 萄糖的菌落为转化酶阴性。具体方法见ISO 8523:1991对于髙污染样品的检测,可以 省略非选择性增菌的步骤,用最大可能值(MIN)方法和菌落计数法计数(见 ISO 7402:1993)o
总肠道菌计数,需要先制备10倍系列稀释液,然后倾倒紫红胆盐葡萄糖琼脂 (VRBGA),选择每克含10~100个菌落的平板计数。每个平板加15mL VRDGA (45V熔化),与接种物混匀,静置,待琼脂凝固后在琼脂表面再加5mL 45的VRBGA琼 脂。凝固后,在适当的温度条件下培养24hISO标准推荐使用的温度为35℃或37℃。 但这类细菌中的一些菌株在35℃或更高的温度下生长不良(或无生化活性)闪此,要得到真实的总肠道菌数,使用30℃的温度培养较合适,因为这时计数结
果较高。但当要求必须使用ISO标准时,则只能按要求进行〖除非计数在35℃或37℃ 以及30℃同时进行]。但仍建议将两套平皿同时在30℃和35℃(或37℃)培养,并对同一 样品在不同温度下的计数结果进行比较和统计分析,以便决定哪个培养温度更适用,从而 更好完成这类菌的检测工作。
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