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振荡与培养基密封培养法



录入时间:2013-12-3 9:22:17 来源:银河澳门官网入口

 振荡培养法

将试管或瓶子中的固体培养基熔化后接种,再使之凝固。所用的最简单的培养基是加人1%葡萄糖的营养琼脂。
(1)将培养基液化,并在100℃保持10min以去掉所有溶解的氧,冷却至45℃,立即使用。

(2)加入接种物,用手旋转试管使试管内容物完全混合,并注意不要产生气泡。

(3)将试管放入冷水中以使琼脂凝固。

(4)在所需的温度下培养。

因为氧穿透固体培养基的速度很慢,因此试管的底部很适合于厌氧菌的生长,这种方法对于微需氧菌和兼性厌氧菌也很适用。

 

培养基密封培养法

使用无菌的密封物质可以无菌地保存液体培养基。含有液体培养基的试管应在沸水浴中加热10min以驱除溶解的氧,然后加入已灭菌的液态凡士林或石蜡密封以隔绝空气。 接种时可将凡士林熔化,用毛细吸管吸取菌液接种(或者是将试管加热,冷却后立即接种,然后再用无菌的密封物质密封I

通过快速凝结反应,该方法可用来证明水或牛乳中的产气荚膜梭状芽孢杆菌,所用的 培养基是无氧的灭菌牛乳,按上述方法进行密封。                                              

Vaspar是一种非常有用的密封物质,它是将凡士林和石蜡以相同的比例混合熔融后制成。在培养基中加人熔化的Vaspar并使其固化后,用火焰慢慢地加热试管的

Vaspar部分,使固化的Vaspar重新熔化并与试管壁紧密粘连以隔绝接触面的空气。灭菌 的石蜡也能起到培养基密封的作用,但它不能检测气体的产生,而且会冇一些氧穿过液体石蜡密封层而溶解到培养基中。

 


 

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