霉菌的鉴定步骤
录入时间:2013-11-8 10:00:42
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1、分离、纯化菌种： 应用分离培养基和纯种移植法,在相应的培养基上培养出单纯菌株。
2、培养特性的观察：按照培养时间、生长速度、菌落质地、颜色、形态、气味、培养基表面变化、孢子及菌丝的颜色、结构、大小进行观察并记录。 3、显微特征的观察 (1)制片镜检:
在洁净的载玻片上加一滴乳酸-苯酚液,用经过火焰灭菌的接种钩从菌落的边缘挑取少许幼嫩的菌体,置于乳酸-苯酚溶液中,然后加盖玻片,注意不要产生气泡,此为临时性的载片标本;若需保存较长时间,可在盖玻片周围用加拿大树胶封牢,贴上标签,做成半永久性标本。 (2)活体观察
活体观察有小培养、大培养和霉变粮粒的显微观察3种方法。
①小培养(载玻片培养)：在无菌条件下,滴一滴无菌的培养基于干净的载玻片上,接种后盖上盖玻片,放人已灭菌的培养皿中,用灭菌的湿棉球或纱布保持湿度,盖好皿盖置培养箱中进行培养,可以随时用显微镜观察其生长和发育情况。
②大培养(培养皿培养)：即将培养有霉菌菌落的培养皿除去皿盖置于显微镜的载物台上,用低倍镜观察霉菌的生长情况,可以看到其营养菌丝、子实体及孢子等。
观察时必须注意:勿让镜头接触霉菌而污染;观察人员不能面对标本,防止孢子飞散吸人体内,影响健康;观察完毕立即加盖,防止污染标本。 ③霉变粮粒观察：取发霉的粮食颗粒,放在载玻片上,然后用低倍镜观察发霉粮粒上的霉菌生长状态和个体形态。
④进行活体观察时,如果倒置显微镜就更方便、更便于观察;如果遇到比较好的菌种标准或视野,也可以用照相机拍下来,苡便长期保存。
4、查对资料、鉴定菌种：根据培养特征、显微特征观察和记录的结果,查对菌属检索表和有关的技术资料,依据菌种的培养性状和个体形态,即可鉴定出霉菌的属、群、系或种。
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