微生物直接计数法
录入时间:2013-10-28 10:26:11
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• 利用血细胞计数板进行直接计数。
• 计数前需对样品做适当稀释,然后将经过适当稀释的菌悬液(或孢子悬液)放在血细胞计数板的计数室内,按照在显微镜下观察到的微生物数目代入计算公式运算后,即可得出单位体积微生物总数目。 • 此法的优点是直观、快速。
• 用于直接测数的菌悬液浓度一般不宜过低或过高(常大于106个/mL)。活跃运动的细菌应现用甲醛杀死或适度加热以停止其运动。
• 显微计数法适用于各种含单细胞菌体的纯培养悬浮液,如有杂菌或杂质,常不易分辨。
• 菌体较大的酵母菌或霉菌孢子可采用血球计数板,一般细菌则采用彼得罗夫·霍泽(Petrof Hausser)细菌计数板。
• 两种计数板的原理和部件相同,只是细菌计数板较薄,可以使用油镜观察。而血球计数板较厚,不能使用油镜,计数板下部的细菌不易看清。 • 每个方格网共分九个大方格,中间的方格即为计数区。
• 计数区分为16个中方格,而每个中方格又分成25个小方格，即计数区都由400个小方格组成。
• 每毫升菌悬液中含有细胞数=每个小格中细胞平均数(N)³ 系数(Κ )³ 菌液稀释倍数(d)。 系数K=400³ 104
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