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    卵磷脂酶试验



    录入时间:2013-10-16 10:17:42 来源:银河澳门官网入口

    1、原理:某些微生物能产生卵磷脂酶,在钙离子存在时,能迅速分解卵磷脂,生成不溶性甘油酯和水溶性磷酸胆碱,在卵黄琼脂平板上菌落周围形成不透明的乳浊环或混浊白环,或使血清、卵黄液变混浊,以此鉴别细菌。 2、试验方法: (1)卵黄平板法  A法:将待检菌培养物划线接种或点种于卵黄琼脂平板上,36±1 ℃培养3~ 6h,观察结果。 B 法: 
    先用卵黄磷脂酶抗血清将平板涂一半,置于36 ℃待干后,将待检菌接种于未涂抗血清的一半卵黄琼脂平板上,再转划已涂过抗血清的一半,36±1 ℃厌氧培养24~ 48h,观察结果。 
    在未涂抗血清的一半平板上,菌落周围形成较大的不透明乳白色混浊区,在涂抗血清的一半平板上,菌落周围无不透明混浊区,为阳性。 两边均无不透明区,为阴性。 
    乳糖卵黄琼脂平板,借以确定该菌可否产生卵磷脂酶。 卵磷脂酶具抗原性,其活性可被相应抗血清所抑制, (2)卵黄盐水法: 
     将庖肉培养基培养物经除菌过滤,收集滤液。在两支灭菌试管内,每管加入1%卵黄盐水0.4mL,在一管中加入滤液0.2mL,另一管加入生理盐水0.2mL作对照。在36 ℃ 水浴中,经2h、 4h、 8h、 24h观察结果。  管底发生混浊沉淀,对照管无沉淀者,为阳性。 3、结果观察与记录: 
     菌落周围形成较大的不透明区,为阳性。  两边均无不透明区,为阴性。 
     管底发生混浊沉淀,对照管无沉淀者,为阳性。  两管无沉淀者,为阴性。

     

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