1、取材与处理
取火鹤花植株茎端,在超净工作台无菌条件下洗净,用自来水冲洗15-20分钟,再用70%酒精浸泡30秒,再用0.2%升汞消毒3-6分钟,之后用灭菌水漂洗3-5次,在解剖镜下剥离2-3mm的茎尖,接种与诱导培养基中(MS+6BA5.0-10.0mg/L+IBA1.0-3.0mg/L),置培养室培养。
2、确定培养条件
环境条件PH5.8,培养温度(26±2)℃,采用自然散射光,光照10-12h/d,光照强度1000-2000lx,光照10-12h/d。
3、继代培养与扩散繁殖
经3-4周培养,茎尖膨大,呈绿色愈伤组织块。将愈伤组织切割接种到继代培养基(MS+6BA0.5-2.0mg/L+IBA0.1-1.0mg/L)中,经5-6周培养,产生芽点,长成小苗。如果需要可以在继代培养基上迅速扩大繁殖。
4、生根
将2cm左右的试管苗,接到1/2M+IBA0.1-0.3mg/L的培养基上。培养2-4周即可生根。
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