支原体培养检验操作程序
一、接收标本:标本与检验单查对正确,标本质量合格。
二、标本处理:接种Uu、Mh 培养药敏一体试剂盒:操作前将所需试剂取出置室温30 分钟。1、A 排第一孔加入培养液100μL 作为阴性对照;2、将标本拭子直接放入培养液中充分振荡并在瓶壁挤干拭子,若为男性尿液取离心沉淀物150μL 或阳性标本取50μL 于培养液中混匀。3、将混有标本的培养液各100μL 加入A 排余下及B 排各孔中;4、各孔加矿物油覆盖,置于37℃温箱培养。
第24、48 小时分别观察记录结果。结果判断原理:培养基含有相应支原体生长所需的蛋白质、马血清、生长因子、底物及酚红指示剂,当有支原体生长时,底物被分解,使PH 值升高,培养基由橙黄色变成红色,且清亮为阳性。培养基不变色为阴性。B1 孔阳性为解脲支原体阳性;B2孔阳性为人型支原体阳性。药敏孔A 排为高浓度,B 排为低浓度,变红则耐药,不变红示敏感而不生长。当高浓度与低浓度两孔均不生长(不变色)为该药敏感;高浓度不变色低浓度变红为该药物中介;高浓度与低浓度均变红为该药物耐药。
结果一:第24 小时B1 孔由橙黄色变成红色示解脲支原体阳性,药敏看结果判断;第24 小时、48 小时观察B2 孔均不变色,示无人型支原体生长或浓度极低,报告培养出解脲支原体,未培养出人型支原体。
结果二:第24 小时B1 孔不变色示解脲支原体阴性;第48 小时观察B2 孔由橙黄色变成红色示人型支原体阳性,药敏看结果判断。报告未培养出解脲支原体,培养出人型支原体附药敏结果。
结果三:第24 小时B1 孔由橙黄色变成红色示解脲支原体阳性,药敏看结果判断;第48 小时观察B2 孔由橙黄色变成红色示人型支原体阳性,药敏看结果判断,报告培养出解脲支原体与人型支原体附药敏结果。
结果四:阳性对照孔由橙黄色变成红色示支原体阳性,药敏看结果判断;第24 小时、48 小时观察B1 孔、B2 孔均不变色,示无解脲、人型支原体生长或浓度极低,报告培养出非解脲、人型支原体或嘱病人重留标本复查。
结果五:第24、48 小时观察B1 孔、B2 孔均不变色,示无支原体生长或浓度极低,报告未培养出解脲及人型支原体。
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