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苹果的花粉培养



录入时间:2012-2-29 16:13:12 来源:互联网

苹果的花粉培养

(一)选取小孢子处于单核期的花蕾枝条。小孢子单核期的花芽外部形态特征是:花芽已充分开放,有4~5片叶完全展开,中心花蕾吐红,周围花蕾明显增大,但花序尚未分离。

(二)把花蕾插入水中,放在1~3℃的冰箱上预处理。

(三)摘取花蕾,在70%的酒精浸约半分钟,再在10%漂白粉上清液中浸15~20min,无菌水冲洗3~5次。

(四)胚状体的诱导。从花蕾中取出花药,接种到MS+0.4mg∕L2,4-D+0.2 mg∕L KIN+4 mg∕L IAA+3~8%蔗糖的固体培养基上培养,每瓶30~50个花药。在25~30℃下培养70d后,由变褐的花药裂口处开始产生胚状体。

(五)无根苗的诱导。 把产生胚状体的花药接种到MS+0.5 mg∕L IBA+0.1 mg∕L GA3+1 mg∕L BA+3~5%蔗糖的固体培养基上培养,在25~30℃和光照10h下,约经40~100d以上,胚状体可形成次生胚状体或丛生芽,进而发育成无根苗。

(六)根系的诱导。切取无根苗,转接到1∕2MS+1.5 mg∕L IAA+15~2%蔗糖的固体培养基上培养。约经15~20d,小苗茎基部长出根,形成完整植株。也可用50~100 mg∕L IBA溶液浸泡苗梢基部15~30 min,再插入无生长素的培养基上,也能较顺利地诱导生根。

(七)花粉植株的移栽。在春、秋季盆栽,保持15~20℃和高空气湿度,一般可使成活率达到40%以上。

(八)对有些不易生根和提早开花的植株,可用嫁接法进行繁殖。

 

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