核酸探针在快速检测食品中致病菌的研究现状
原理:将己知核苷酸序列DNA片段用同位素或其他方法标记,加入己变性的被检DNA样品中,在一定条件下即可与该样品中有同源序列的DNA区段形成杂交双链,从而达到鉴定样品中DNA的目的。
核酸探针:能认识到特异性核苷酸序列,且有标记的单链DNA分子。
核酸探针的应用主要的范围:
(1)用于检测无法培养,不能用作生化鉴定、不可观察的微生物产物以及缺乏诊断抗原等情况,如肠毒素基因。
(3)检测细菌内抗药基因。
(4)分析食品是否会被某些耐药菌株污染,判定食品污染的特性。
(5)细菌分型,包括rRNA分型。
核酸探针检测技术的最大优点是:
(1)特异性;
(2)敏感性。
存在的问题:
检测一种菌就需要制备一种探针;要达到检测量还要对样品进行一定时问的培养;探针检测是分析基因序列,对毒素污染的食品有时因样品中不含产毒菌而无法检测。
制备核酸探针杂交技术:
(1)夹心杂交法
(2)核酸置换杂交分析法
(3)浸染棒法