(一)建立合理的常规药敏种类
不同抗生素的抗菌谱不同、抗菌强度不同、细菌耐药谱不同、对不同的病原菌建立正确的常规药敏种类是非常必要的,错误的药敏种类的报告会误导医生,按CLSI要求和根据本单位用药习惯建立药敏常规试验的种类。
(二)M-H琼脂平皿定量
在琼脂扩散法药敏试验中,M-H琼脂厚度是严重影响纸片药敏试验结果的重要因素,琼脂培养基越厚抑菌环直径越小、反之则越大;克服的办法是要在保持水平的平台上(水平仪)定量倾注培养基,这个问题至今未被充分的重视。10cm的平皿应倾注23-25ml的培养基。
(三)抗菌药纸片贮藏
纸片失效是造成药敏结果错误的最重要的原因,必须在-20℃或更低温度的低温冰箱中保存纸片,近期使用的纸片只需放4℃冰箱,一周后弃取,更换新纸片。
(四)特殊菌药敏规范化
(1)万古霉素中介菌株的报告: 中介肠球菌药敏试验应用含6mg/l万古霉素的琼脂,点种0.5麦氏单位菌液,35℃培养18~24h,点种菌生长者示为耐药,不生长者示为敏感,;葡萄球菌对万古霉素中介(中度敏感)时,应再测定其最低抑菌浓度(MIC)确定。
(2) 葡萄球菌苯唑西林中介株: 用含4%NaCL和每升含6 mg 笨唑西林的琼脂,点种0.5麦氏单位的菌液,置35℃培养24h,生长者为耐药株。不生长者为敏感株。
(3)克林霉素报告:必须在“D”试验的基础上,“D“试验是在琼脂或血琼脂平皿上均匀涂被测菌,稍后,在 相距15~26mm分别贴15ug/片红霉素纸片和2ug 克林霉素纸片,培养18~24h后,在克林霉素侧出现切痕为“D”试验阳性,应报告克林霉素耐药,无切痕可报告敏感。
(4)耐甲氧西林金葡菌(MRSA):用头孢西丁纸片代替苯唑西林纸片,试验结果仍应报告为苯唑西林敏感或耐药。
(5)肠外标本中分离的沙门菌属:当环丙沙星MIC=0.12~1.0mg/L低耐时用奈啶酸测试MIC,当MIC=2mg/l为中介度(I),MIC≥4 为耐药(R)。
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