胚珠培养
概念:在无菌条件下对授粉的子房取出胚珠进行培养的过程。有时也把胚珠连同胎座一起取下来培养。
优点:胚珠培养可以解决象兰科植物成熟胚较小不易培养的问题。另一方面在未受精的胚珠培养中,可诱发大孢子发育成单倍体,用于单倍体育种。
接种和培养基:从花中取出子房进行表面消毒,在无菌条件下进行解剖,取出胚珠,放在培养基上培养;多用Nistch培养基,也可采用MS、N6、B5等培养基。
注意:关键是选择胚的发育时期,实验证明发育到球形胚期的胚珠较易培养成功。另外可取用带胎座甚至带部分子房的胚珠进行培养。
胚乳培养
概念:指对由两个单倍的极核和一个单倍的精子结合而成的三倍体组织的培养。可获得无子结实的三倍体植株,进而可将它加倍成六倍体植株。
接种和培养基 :取授粉4~8天后的幼果,常规消毒后,在无菌条件下切开果实,取出种子,小心分离出胚乳。接种在培养基上;
培养过程:
I)接入MS、White等培养基,附加2,4-D或NAA 0.5~2.0,BA0.1~1.0。在25~27度和黑暗条件或散射光下培养,约6-10天胚乳开始膨大,形成愈伤组织;
II)转入分化培养基,MS培养基附加0.5~3.0 mg/l的BA及少量的NAA。使愈伤组织长出芽。
III)切下不定芽,插入生根培养基中,光下培养10~15天,切口处可长出白色的不定根。
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