(一)花器官培养
花器官培养指整个花器及其组成部分如花托、花瓣、花丝、花柄、子房、花药等的无菌培养。子房和花药培养另有专门叙述。
应用:理论上通过离体花芽培养可了解整体植物和内源激素在花芽性别决定中所起的作用。可以了解花器各部分对果实和种子发育的作用,以及内、外源激素在果实种子发育过程中的调控作用。生产上可用于珍贵品种的扩大繁殖。培养方法如下:
1.取材 从健壮植株上取未开放的花蕾,已经开花的不宜用,因为消毒困难。先用75%酒精消毒约30秒钟,再用饱和漂白粉浸10~15分钟,取出用无菌水冲洗数次。
2.接种培养 用整个花蕾培养时,只要把花梗插入培养基中。若用花器,则分别取下切成小片。
I)培养基: MS、B5等。若让花器官育成小植株,要用诱导培养基,加入生长激素和细胞分裂素,先形成愈伤组织或胚状体,再分化培养成植株。如菊花的花瓣片接在含6-BA 2mg/L、NAA 0.2的MS培养基上,形成少量愈伤组织。再经1个月就分化出绿色芽点,再切割转接,可形成大量无根苗,用于繁殖。
II)26℃ 1500Lx光照,每天光照10小时,培养约2周,
(二)种子培养
种子培养是指受精后发育完全的成熟种子和发育不完全的未成熟种子的无菌培养。这项技术广泛地应用于花卉、蔬菜、果树、农作物等的种子培养之中。
优点:可以打破种子休眠,特别对一些休眠期长的植物;可以作为大量生产试管苗的好材料,它分化容易,无菌操作方便。可使远缘杂交产生的杂种败育种子,正常萌发产生第二代植株。培养技术如下:
1.种子灭菌 种皮厚或不饱满的种子,宜用0.1%升汞消毒10~20分钟。幼嫩的或发育不全的种子,宜用饱和漂白粉消毒15~30分钟。若种子上有绒毛或蜡质,应先用95%酒精或吐温40处理,提高消毒效果。对壳厚难萌发的种子,可去壳培养。
2.培养基 若以种子萌发为目的,培养基可不加或少加生长激素。对某些发育不全的无胚乳的种子培养,应提供适当的生长激素。种子培养的糖浓度可稍低,一般1~3%。
3.接种培养 种子培养的接种较容易,每瓶3~5粒,均匀排列,
4培养条件:20~28℃,1000~2000Lx光强,每天光照10小时。
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