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植物组培茎段培养



录入时间:2011-12-28 9:55:54 来源:互联网

 

   概念:指不带芽和带1个以上定芽或不定芽的,包括块茎、球茎在内的幼茎切段的无菌培养。

 

培养目的:快速繁殖。也可研究茎细胞的生理,以及筛选突变体育种。

 

    快繁优点: 培养技术简单易行,繁殖速度较快;芽生芽方式增殖的苗木质量好,且无病,性状均一;解决不能用种子繁殖植物的快速繁殖问题等。

 

1材料选择和处理  

 

取生长健壮无病虫的幼嫩枝条或鳞茎盘,木本则取当年生嫩枝或一年生枝条,剪去叶片,剪成34cm的小段。

 

注意:1)尽力取顶部茎切段和顶芽,但由于顶芽少可利用腋芽,但尽力用茎上部的腋芽。2)尽量在生长期取芽,休眠期成活率降低。如苹果在36月取材的成活率为60%,711月下降到10%,122月都在10%以下。

 

在自来水中冲洗13小时,75%酒精灭菌3060秒,再用0.1%升汞浸泡38分钟,或用饱和漂白粉浸泡1020分钟,因材料老嫩和蜡质多少而定时间。最后用无菌水冲洗数次,以备接种。

 

2.培养选MS培养基,加入3%蔗糖,用0.7%的琼脂固化。培养条件保持25℃左右,给予充分的光照和光期。

 

培养物的变化:1)基部切口上长出愈伤组织,呈现稍许增大,控制不要过大。2)而芽开始长长,有时会出现丛生芽,培养方式或是培养出芽梢或是培养芽丛,从而得到无菌苗。

 

    培养基:促进腋芽增殖用6-BA是最为有效的,依次为KtZt等。生长素虽不能促进腋芽增殖,但可改善苗的生长,也要适量加入。GA对芽伸长有促进作用。

 

   继代扩繁:包括二种途径,一是促进腋芽的快速生长,二是诱导形成大量不定芽。第一种途径的好处是不会产生变异,能保持品种优良特性。且方法简便,可在各种植物上使用,每年从一个芽可增殖10万株以上。第二种途径虽会产生变异,繁殖系数较高,适于多数植物。

 

    生根培养和移栽驯化与茎尖培养相似,不再重复。

 

同样注意驯化管理。要进行炼苗,小心移栽,初期湿度要大,基质通气湿润,保湿保温,特别要精心管理等。

 

 

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