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    实验:酵母菌形态观察



    录入时间:2011-12-23 16:45:41 来源:生物在线

    实验目的 

        认识酵母菌的形态结构,掌握其观察方法。 

    实验内容 

    1.酵母菌菌落特征的观察 

    2.酵母菌细胞形态及芽殖方式 

    3.液泡的活体染色观察 

    4.肝糖粒染色观察 

    5.脂肪粒染色观察 

    实验原理 

        酵母菌是单细胞真菌,通常呈圆形、椭圆形或卵圆形,其菌落较大而厚,湿润,较光滑,颜色多为乳白、灰黄、淡黄、灰褐色,少见粉红或红色,偶见黑色。酵母菌个体比细菌大几倍到十几倍, 

    在高倍镜下即能观察清楚。细胞内常有明显的细胞核及其内含物。无性繁殖以芽殖为主,在细胞的一端初生小突起如芽,逐渐增大,芽缢裂而与母细胞分离,形成独立的菌体。发生的芽如不立即脱离母细胞并继续出芽,则多数芽细胞集聚成芽簇。在陈旧培养中,芽簇细胞伸长成丝状,称假菌丝。

    酵母菌的有性生殖形成子囊袍子,其过程由两个菌休细胞结合后,其中配合的细胞核分裂,形成 2个、4个或 8个子囊孢子。 

    实验器材 

    酿酒酵母培养物 

    显微镜、载玻片、盖玻片、接种针 

    0.1%美蓝液、中性红染色液、碘液 

    实验步骤 

    1.菌落特征的观察 

        取少量酿酒酵母划线接种在土豆平板培养基上,28—30℃养 3—5d。用肉眼观察菌落特征,项目包括菌落表面湿润或干燥、有无光泽、隆起形状、边缘形状、大小、颜色等。 

    2.酵母菌细胞形态及芽殖方式 

        在洁净载玻片上滴加一滴无菌水或 0.1%美蓝液一滴, 用接种环取酵母菌菌台少许与无菌水或美蓝液混匀,盖上盖玻片,即成为水浸片。用高倍镜观察酵母细胞形态及出芽情况。 

        染液不宜过多或过少,否则,在盖上盖玻片时,菌液会溢出或出现大量气泡而影响观察。盖玻片不宜平着放下,以免产生气泡影响观察 

    3.液泡的活体染色观察 

        在洁净的载玻片上滴加一滴中性红染色液, 用接种环取少量酿洒酵母与染液混匀, 染色 4—5min后,盖上盖玻片在显微镜下观察。中性红是液泡的活体染色剂,当细胞处于生活状态时,液泡被染成红色,细胞质及核不着色;若细胞死亡,液泡染色消失,细胞质及核呈现弥散性红色。 

    4.肝糖粒染色观察 

        用酿酒酵母涂片,自然干燥后滴加 1—2滴碘液,盖上盖玻片后在显微镜下观察。肝糖粒遇碘呈深红褐色。 

    5.脂肪粒染色观察 

        加一小滴苏丹黑于洁净的载破片上,挑取少许酵母菌体与之混匀,盖上盖玻片后镜检。脂肪粒呈黑色。 

    实验结果及讨论 

    1.实验结果 

        绘图说明你所观察到的酵母菌的形态特征。 

    2.讨论 

        针对实验原理、步骤、现象进行讨论。

     

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