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组培母液 stock solution的配制和保存



录入时间:2011-12-23 9:51:52 来源:互联网

 

    在组织培养工作中,配制培养基是日常工作。为简便起见,通常先配制一系列母液,即贮备液。 所谓母液是欲配制液的浓缩液,这可保证各物质成分的准确性及配制时的快速移取,并便于低温保藏。一般配成比所需浓度高10100倍的母液。母液配制时可分别配成大量元素、微量元素、铁盐、有机物和激素类等。配制时注意一些离子之间易发生沉淀,如Ca2和SO42,Ca2、Mg2和PO43-一起溶解后,会产生沉淀,一定要充分溶解再放入母液中。配制母液时要用蒸馏水或重蒸馏水。药品应选取等级较高的化学纯或分析纯。药品的称量及定容都要准确。各种药品先以少量水让其充分溶解,然后依次混合。一般配成大量元素、微量元素、铁盐、维生素等母液,其中维生素、氨基酸类可以分别配制,也可以混在一起。母液配好后放入冰箱内低温保存,用时再按比例稀释。

    下面以MS培养基制备为例,概述其制备方法(表32)。

1.大量元素母液可配成10倍液。用分析天平按表32称取药品,分别加100ml左右蒸馏水溶解后,再用磁力搅拌器搅拌,促进溶解。注意Ca2+PO43-易发生沉淀。然后倒入1000ml 定容瓶中,再加水定容至刻度,即成为10倍母液。

2.微量元素母液  可配成100倍液。用分析天平按表准确称取药品后,分别溶解,混合后加水定容至1000ml。

3.铁盐母液 可配成100倍液,按表称取药品,可加热溶解, 混合后加水定容至1000ml 。

4.有机物母液  可配成500倍母液。按表分别称取药品,溶解,混合后加水定容至500ml 。

   5.激素母液的配制

    每种激素必须单独配成母液,浓度一般配成1mg/ml。用时根据需要取用。因为激素用量较少,一次可配成50ml 或100ml。另外,多数激素难溶于水,要先溶于可溶物质,然后才能加水定容。它们的配法如下:

    I AA、IBA、GA先溶于少量的95%的酒精中.再加水定容到一定浓度.

    NAA可溶于热水或少量95%的酒精中,再加水定容到一定浓度.

    2,4-D可用少量NaOH溶解后,再加水定容到浓度。

    KtBA先溶于少量1molHCl中再加水定容.

    玉米素先溶于少量95%的酒精中,再加热水到一定浓度.

配制好的母液瓶上应分别贴上标签,注明母液名称、配制倍数、日期及配一升培养基时应取的量。

 

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