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植物组培的实验设备及培养条件(1)



录入时间:2011-12-22 10:05:20 来源:互联网

 

目的要求:

1.掌握组织培养实验室的设计

2.掌握组织培养常用的实验仪器设备及其使用方法

3.掌握调控组织培养的主要环境条件

2.1 实验室

组织培养实验室包括:

2.1.1洗涤室

洗涤室完成玻璃器皿等仪器的清洗、干燥和贮存。

2.1.2配置室

准备室完成培养基制备以及试管苗出瓶、清洗与整理工作。配备仪器设备有:

1)普通冰箱 主要用于贮存母液、各种易变质、易分解的化学药品以及植物材料等。对一些易结晶物质使用前要经加温处理。

2)分析天平

3)电蒸馏水器 。

4)磁力搅拌器  磁力搅拌器用于加速搅拌难溶的物质,如各种化学物质、琼脂粉等 。磁力搅拌器还可加热,使之更利于溶解。

5)酸度计 

6)高压灭菌锅

7)恒温培养箱 内有温度感受器,控制箱内温度到所调指标生化培养箱还配有光照装置,用于植物材料的培养。

2.1.3接种室

接种室是完成植物材料的分离接种及培养物转移。

2.1.3接种室

接种室是完成植物材料的分离接种及培养物转移。

接种室宜小:密闭光滑,配置拉动门。

接种室要求干爽。吊装紫外线灭菌灯,最好安装一小型空调,接种室应设有缓冲间,面积2 m2为宜。

接种室的主要设备及用具有:

1) 超净台cleaning table

工作优点:操作方便自如,比较舒适,工作效率高,准备时间短。可长时间使用。

工作原理:功率在145260W左右,它装有小型鼓风机,使空气穿过一个前置过滤器和高效过滤器,除去大于0.3μm的尘埃、细菌和真菌孢子等,最后以较洁净的气流吹到工作台面。超净空气的流速为每分钟2430m,这已足够防止附近空气袭扰而引起的污染,这样的流速也不会妨碍采用酒精灯对器械等的灼烧消毒。

种类:水平式和垂直式二种型号。

未来机器人接种可免除超净台

2) 解剖镜  用于分离微茎尖可采用双筒实体解剖镜。

双筒解剖镜在分离茎尖等较小组织时,便于观察、操作,通常放大5~80倍。 放大40倍以上操作需要有相当熟练的技术和较好的工具。

3) 无菌操作器具 按单人超净台计算:酒精灯1个;医用镊子(2025cm 1把;4号解剖刀1把;医用剪(15cm 1把;酒精消毒瓶(250ml1支;酒精棉球若干,无菌器皿1个;废物皿1个;打火机等。

2.1.4培养室culturing room

是将接种的材料进行培养生长的场所。培养室大小依规模决定。

培养架规格。

培养架大多由金属制成,一般设5层,

最低一层离地高约100cm,其它每层间隔30cm左右,培养架即高1.7m左右。

培养架长度都是根据日光灯的长度而设计,如采用40W日光灯,则长1.3m左右,宽度一般为60cm。

培养条件控制

1温度, 一般保持在20-27℃左右,由空调机调节。由于热带植物和寒带植物等不同种类要求不同温度,最好不同种类有不同的培养室。2室内湿度也要求恒定,相对湿度以保持在70-80%为好,可安装加湿器。

2光照安装日光灯和安装定时器,一般需要每天光照10-16h。

可白天开灯,也可晚间开灯

.2 设备和器材

2.2.1玻璃器皿

1三角瓶,

规格:有100、250、500ml等,一般使用100ml三角瓶,

优点:培养面积大, 利于组织生长,受光也比试管好。由于瓶口较小,亦不易污染。

2培养皿

规格:常用9、12cm直径,要求上、下能密切吻合。

适于:游离细胞、 原生质体、花粉等的静置培养、看护培养、无菌种子的发芽、植物材料的分离等。

3试管

规格:常用18×180 mm20×200mm。

特点:可用于培养较高的试管苗,不易污染。

但培养量较少。

4代用广口的200ml罐头瓶,加盖半透明的塑料盖,特点:成本较低,操作方便,也减少了培养材料的损伤。

但缺点是易引起污染。

5代用塑料器皿。

特点:具有质轻、透明、不易破碎、成本低等优点,如培养容器多为平底方盒形,可提高培养空间利用率。必须是采用聚丙烯材料制成,能耐高温。缺点透明度不好,不耐过火灼烧。

6瓶口封塞

要求:要具有一定的通气性和密闭性,以防止培养基干燥和杂菌污染。

1 以前用棉塞。但这种封口办法夏季极易污染,且不易保持培养基湿度。

2 用聚丙烯塑料薄膜,以线绳结扎或橡皮圈箍扎。

为了增加通气性,可在里面衬一层硫酸纸或牛皮纸。这样经济方便, 且通气好。

3 也可采用专用的封口膜。

7其它器皿

用处:配制培养基,贮藏母液,材料的消毒等需要各种化学实验用的玻璃器皿,

种类:包括100、250、500、1000ml烧杯;10、100、1000ml量筒; 100、1000ml试剂瓶(棕色)等等。

 

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