玻片沉淀反应
此方法具有快速、不需要设备和提取免疫球蛋白的优点,但灵敏度不高。
1.实验材料和用具
(1)正常血清和抗血清
(2)系统感染病毒的植株和健康植株
(3)生理盐水和0.01MPBS缓冲液
(4)载玻片、玻棒、研钵、微量离心管、饭盒、台式离心机、25oC温箱
2.实验步骤
(1)用生理盐水稀释血清为三个浓度:1,1 ∶5,1 ∶10。
(2)取1cm 显症叶片,加2mlPBS缓冲液研磨,取汁液,3000转离心2分钟后得悬浮液约为1 ∶10,再配成1 ∶20抗原悬浮液。设置健康对照。
(3)取洁净载片,两端分别滴加正常血清和抗血清30 μl。
(4)再滴加等量抗原悬浮液。
(5)用玻棒搅匀后将玻片放入饭盒保温,在25oC温箱中孵育25-40分钟。
(6)解剖镜或低倍显微镜中观察沉淀形成并记录结果。
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