2.3 人工污染样品检测结果
纯菌污染样品检测结果：用单增李斯特菌
单增李斯特菌和非李斯特菌混合污染样品检测结果：将单增李斯特菌和非李斯特菌10-3～10-8 混合菌液污染牛奶和猪肉后，国标检测结果表明，这4种培养基上都可以检测出单增李斯特菌，说明非李斯特菌存在时，HKListeria、CHROMagarListeia、OXA、MMA仍可以达到相同的效果，非李斯特菌对单增李斯特菌没有太大影响。单增李斯特菌、英诺克和非李斯特菌混合污染样品检测结果：当单增李斯特菌和英诺克按100 cfu：10 cfu混合污染牛奶和猪肉后，按国标法4种培养基都可检出单增李斯特菌，在HKListeria和CHROMagar Listeia上呈现蓝色带晕环菌落，英诺克呈现蓝色无晕环菌落，其他杂菌基本不长，在OXA和MMA上单增李斯特菌和英诺克都分别呈现黑色和蓝白色菌落，二者无法区分；当单增李斯特菌和英诺克按10 cfu：10 cfu和10 cfu：100 cfu比例混合时，HKListeria和CHROMagar Listeia上只有英诺克生长，单增李斯特菌和其他非李斯特菌均未生长，表明英诺克存在时对单增李斯特菌检测有一定影响。
2.4 实际样品检测
实际样品检验结果如表4。62份实际样品共检出李斯特菌15份，其中猪肉检出英诺克4株，格式李斯特2株；鸡肉检出单增李斯特菌1株，英诺克3株，格式李斯特2株；鱼肉检出英诺克2株；牛肉检出英诺克1株；其他样本未检出。阳性样品在4种培养基上检测结果符合率为100％ 。HKListeria、CHROMagar Listeia的检测效果优于OXA、MMA，能够区分单增李斯特菌和其他李斯特菌。表4 实际样品中李斯特菌检测结果
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样品 |
HKListeria |
CHROMagarListeria |
OXA |
MMA |
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猪肉（19份） |
6（31.6%） |
6（31.6%） |
6（31.6%） |
6（31.6%） |
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牛肉（5份） |
1（20%） |
1（20%） |
1（20%） |
1（20%） |
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鸡肉（17份） |
6（35%） |
6（35%） |
6（35%） |
6（35%） |
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鱼肉（10份） |
2（20%） |
2（20%） |
2（20%） |
2（20%） |
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熟食（3份） |
0 |
0 |
0 |
0 |
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蔬菜（4份） |
0 |
0 |
0 |
0 |
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蛋糕（4份） |
0 |
0 |
0 |
0 |
括号中表示同一类样品中阳性样本的检出率
3 讨论
利用显色培养基鉴定细菌是一种新的快速检测方法，通过在培养基中加入细菌特异性酶的显色底物，直接观察菌落颜色就可对菌种作出鉴定 。在HKListeria和CHROMagarListeria显色培养基上，单增李斯特菌呈现蓝色带晕环的菌落，其他李斯特菌呈现蓝色不带晕环的菌落。金黄色葡萄球菌、蜡样芽胞杆菌、粪链球菌等杂菌或被抑制或没有晕环，菌落形态与单增李斯特菌有明显区别。
在本试验中，对单增李斯特纯菌液、单增李斯特和非李斯特菌混合菌液的检测结果表明，HKListeria、CHROMagar Listeria上单增李斯特菌的检出率与对照平板TSA—YE没有明显差异，说明HKListeria和CHROMagar Listeria对单增李斯特菌基本没有抑制作用；人工污染样品和实际样品检测结果表明，HKListeria和CHROMagar Listeia具有更高的检测效率，可根据菌落颜色和形态直接对单增李斯特菌作出鉴定，而OXA、MMA上生长的菌落还需进一步生化鉴定才能确定结果。因此，HKListeria和CHROMagar Listeria具有较高灵敏度、特异性和选择性，是非常有价值的分离平板，可为食品微生物的快速检测提供有力帮助。
另外，试验中还发现，当样品中英诺克数量高于单增李斯特菌时，单增李斯特菌不能够有效地检出。Restaino L等人也曾有类似的报道，英诺克数量高时容易造成单增李斯特菌检测结果的假阴性。分析可能是英诺克在增菌过程中生长过快，数量过多，对单增李斯特菌产生了一定的竞争或抑制作用。因此，在使用显色培养基检测单增李斯特菌时，要特别注意英诺克的干扰问题。
作者：张淑红 ，吴清平，张菊梅
作者单位：广东环凯微生物科技有限公司，广州 510070；2．广东省微生物研究所 广东省菌种保藏与应用重点实验室，广州 510070
[参考文献]
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[2]陈太基，袁宝君．单核增生性李斯特菌检测方法的应用验证[J]．江苏预防医学，2002，13(4)：6l一62．
[3]吴清平，周艳红，蔡芷荷．卫生微生物特异性显色培养基的研究与应用[J]．中国卫生检验杂志，2005，15(1)：124—126．
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[5]Manail M．Fluorogenic and chromogenic enzyme substrates in culture media and identification tests[J]．Int J Food Microbiol，1996，31(3)：45—58．
