【关键词】 实验室技术和方法；质量控制；管理制度
Quantity Control Analyze of Examination Analysis in Member Microbe Room
Key words:Laboratory technique and method; Quantity control;Manage system
随着检验医学的迅速发展，检测技术也在不断提高，各大医院都给分子微生物实验室配备了最先进、精密度、准确度最好的全自动荧光定量分析仪。我院从2000年开始配备了由美国PE公司生产的全自动荧光定量分析仪，是由我院的性质决定的。我院为传染病专科医院，工作量大，要求时间短，为确保所测项的准确性而配备的，同时要求分子微生物室操作人员必须经过严格的培训后持有上岗证，才能进行此项操作。此外检验人员还要不断学习新技术，掌握新知识，了解检验医学的新动向，在检测过程中要严格遵守操作规程，提高检验技术水平，防止标本间的交叉污染，以及扩增产物的污染等就显得十分重要，这是做好试验的关键所在。在分析过程中为确保报告单的准确性可分为3个环节：分析前、分析中、分析后，其中哪一个环节都不能忽视。现将整个环节进行解析如下。
1 加强分析前的质量管理
1.1 采血器械的标准化 长期以来由于采血器械没有统一的标准，使用存在的不少问题，如软质塑料试管采血，由于污染问题的存在可造成结果不准确，这样大夫在诊断和治疗以及用药方面带来了很多不便，也不可避免的造成了假阳性结果(对乙肝DNA而言)，或者是假阴性结果(对丙肝RNA而言)。近年来，我科使用真空采血系统，这样就减少了医务人员在采血过程中的交叉感染，同时也减少了体外溶血的发生而造成的检验结果的误差。
1.2 按规定时间进行 采血一般建议患者早晨空腹采血，因乳糜血会影响结果的准确性，使结果偏低。在疾病发展过程中，标本的采集过早或过晚都可能会给出假阴性结果。
1.3 防止标本采血不当造成溶血 标本溶血对RNA的测定有较大影响，如果标本溶血，血细胞破裂会有大量RNAse释放而使提取核酸的模板RNA降解。溶血多由于采血步骤不规范、技术不熟练而造成，如抽血不顺利、抽血时压力过大等。
1.4 标本送检要及时 采集后的标本应及时送检，由于分子微生物实验室对标本要求比较严格，比如HCVRNA的检测要求标本送检后必须在2 h内分离出血清，如短时间(1周~2周)保存在-20 ℃，长时间保存应在-70 ℃以下。
1.5 标本确认和申请单的核对 住院和门诊患者都要检查姓名、年龄、开单时间、接标时间、检测项目等逐一进行登记，以免发生标本错误。标本在分离转移时要避免发生错误和交叉污染，标本若发生溶血、脂血等应拒收，然后填写拒收报告单。
2 注重分析中的质量管理
2.1 仪器的维护 全自动荧光定量分析仪(PCR仪)属于精密电子仪器，应当在15 ℃~25 ℃之间运行。室温太高或太低都会引起仪器内的程控芯片和其他元件不正常工作。除此之外，要注意室内的湿度，保持室内卫生，避免阳光直射，最好专人使用、维护和保养，PCR仪应定期用电子测温仪校准温度。
2.2 试剂的准备 所测项目应严格按照试剂盒说明书来进行，分析过程中每加一步试剂都必须认真仔细防止试剂被污染，注意更换吸头，所有操作过程一律都在生物安全柜内进行。试剂一般根据标本用量来进行配制，避免反复冻融。
2.3 分析过程中质量控制 分子微生物实验室的质量控制主要由室间质控、室内质控来评价，室间主要反映实验室结果的准确性及可比性，室内主要反映实验室的精密度。除此之外，质控物的复溶和保管也是重要的。在发报告单之前要对所测质控值进行分析，看是否在控，如不在控要分析原因，采取纠正措施。
3 重视分析后的管理
3.1 管理体系 我院采用微机录入、微机采集、微机审核的管理体系，每份报告结果均由检测者和审核者检查审核后才能发出。在审核过程中对结果有可疑时应进行复查，并通知大夫第2天再报结果。标本检测完后，我室将原标本和血清标本一起保存14 d，以免有疑义时进行复查。
3.2 结果分析和解释 测定结果与临床诊断不符要进行复查、要及时和临床医生沟通。由于PCR试验受多种因素的影响，应做好解释工作。如果在检测中出现免疫标志与分子生物学标志发生矛盾时，应结合临床的全面情况作出合理的解释。
［1］ 卫生部临床检验中心.98全国临床化学室间质评总结大会专题报告集［R］.1998，11.
［2］ 李影林.中华医学检验全书［M］.北京：人民卫生出版社，1996，8(9).
［3］ 刘克莉，方宏罡，赵士平.中国误诊学杂志，2006，6(1)：170171.
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