真菌在其生长发育过程中，表现出复杂多样的形态特征。一般可将其分为维持生存的营养体和传宗接代的繁殖体两类。真菌营养生长阶段的结构统称为真菌的营养体。真菌的菌丝体在一定条件下可以形成多种特殊的变态结构，如吸器、附着胞、附着枝、假根、菌套和菌网等。菌丝体有时可以纠结在一起形成菌组织。菌组织可以形成菌核、子座和菌索等各种菌组织体。

 

真菌产生孢子的机构，无论是有性的还是无性的，统称为子实体。真菌的孢子分为无性孢子和有性孢子两类。无性孢子有游动孢子、孢子囊孢子、分生孢子和厚垣孢子；有性孢子有休眠孢子(囊)、卵孢子、接合孢子、子囊孢子和担孢子。真菌孢子的形态特征是鉴定和分类学上重要的依据，其营养体及其变态和菌组织体则是真菌分类的重要参考依据，有的还是重要的鉴别特征和分类依据。

 

一、目的要求

通过实验了解真菌的一般形态特征，并初步掌握徒手切片、制片和绘制病原菌草图技术。

 

二、仪器与用品

显微镜、幻灯机、投影仪、计算机及多媒体教学设备，灭菌培养皿、载玻片、盖玻片、浮载剂(蒸馏水和乳酚油)、挑针、镊子、双面刀片、通草、擦镜纸、无菌水等。

 

三、实验材料

(1)甘薯软腐病菌(Rhizopus stolonifer)

(2)棉花立枯病菌(Rhizoctonia solani)

(3)尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum)

(4)大白菜霜霉病菌(Peronospora parasitica)

(5)炭疽菌(Colletotrichum sp.)

(6)油莱菌核病菌(Sclerotium sclerotiorum)

(7)水稻纹枯病菌(Rhizoctonia solani)

(8)麦角病菌(Claviceps purpurea)

(9)苹果或甘薯紫纹羽病菌(Helicobasidium purpureum)

(10)稻曲病菌(Ustilaginoidea oryzae)

 

(1)水霉菌(Saprolegnia sp．)

(2)腐霉菌(Pythium sp．)

(3)疫霉菌(Phytophthora sp．)

(4)根霉菌(Rhizopus sp．)

(5)毛霉菌(Mucor sp．)

 

(6)犁头霉菌(Absidia sp．)

(7)玉米大斑病菌(Exserohilum turcicum)

(8)小麦白粉病菌(Oidium monilioides)(无性态)

(9)大豆灰斑病菌(Cercospora )

(10)茄黄萎病菌(Verticillium )

(11)稻瘟病菌(Pyricularia oryzae)

(12)马铃薯早疫病菌(Alternaria solani)

(13)棉花枯萎病菌(Fusarium oxysporum)

(14)芸薹根肿菌(Plasmodiophora brassicae)

(15)玉蜀黍节壶菌(Physoderma maydis)

(16)谷子白发病菌(Sclerospora graminicola)

(17)禾白粉病菌(Blumeria graminis)(有性态)

(18)小麦赤霉病菌(Gibberella zeae)

(19)苹果树腐烂病菌(Valsa mali)

(20)麦角病菌(Claviceps purpurea)

(21)小麦腥黑穗病菌(Tilletia caries)

 

以上材料为实物标本或新鲜材料、挂图、病原菌永久玻片多媒体教学课件(包括幻灯片、录像带、光盘等影像资料)等。

 

四、观察内容和方法

 

(一)真菌的菌丝体及其变态和菌组织

1．无隔菌丝挑取培养皿中的甘薯软腐病菌或瓜果腐霉的少许菌丝体，用蒸馏水或乳酚油作浮载剂，制临时玻片镜检。观察其菌丝形态特点。

提示：浮载剂放得太多容易使盖玻片和观察物飘浮移动，不易镜检。一般情况下，浮载剂只需加半滴即可。

 

2．有隔菌丝挑取培养皿中的镰刀菌的少许菌丝体，用蒸馏水或乳酚油作浮载剂，制临时玻片镜检。观察其菌丝形态特点。 

 

提示：对一些无色透明的病菌，显微镜下观察时，注意调节光源，光线不宜过强。挑取菌丝量尽量要少，并将其分散，以便观察。

 

3．菌丝变态

(1)吸器。从幻灯片或照片观察吸器形态。

(2)假根。取永久玻片，观察孢囊梗基部的假根——外表像根的根状菌丝。

(3)附着胞。从幻灯片或照片观察炭疽病的附着胞形态。

 

4．菌组织体

(1)菌核。观察油菜菌核病菌核的外形、颜色、大小，并镜检菌核切片，比较菌核外部组织和内部组织菌丝细胞的形状、大小及排列情况。

(2)菌索。观察幻灯片上的根状菌索，是由菌组织形成的绳索状结构，外形与高等植物的根相似。

(3)子座。切片观察稻曲病的分生孢子座，观察幻灯片上的麦角菌子座。

提示：切片时要注意切得要薄，观察切片时往往看到的只是菌组织体整体结构的一部分，一定要注意从局部联想其整体轮廓。

 

(二)真菌的繁殖体

1．无性孢子

(1)游动孢子囊和游动孢子。挑取水霉菌、绵霉菌或腐霉菌培养物，制作临时切片，镜检游动孢子囊和游动孢子。

(2)孢子囊和孢囊孢子。挑取根霉菌培养物，制作临时切片，镜检孢子囊和孢囊孢子。注意观察孢子囊的结构、囊轴、孢囊梗、假根及匍匐丝和孢囊孢子形态特征。

(3)分生孢子。其色泽、形态变化较大，从无色至深色，单胞到多胞，并具多种形态。采用挑、刮或切片的方法，取玉米大斑病菌、小麦白粉病菌、马铃薯早疫病菌的病害标本，制作临时切片，观察分生孢子形态。注意观察其分生孢子的颜色、分隔及其形状。

(4)厚垣孢子。挑取镰孢霉菌的培养物制片、镜检。菌丝中或孢子中个别细胞膨大、细胞壁加厚的孢子即厚垣孢子。

 

2．有性孢子

(1)休眠孢子囊。取甘蓝根肿菌属或玉米节壶菌切片，镜检观察休眠孢子囊形态。

(2)卵孢子。取谷子白发病病穗，制作临时切片，镜检卵孢子形态。

(3)接合孢子。取永久玻片观察接合孢子形态。

(4)子囊孢子。从小麦赤霉病病穗上挑取子囊壳，制片镜检子囊壳、子囊及子囊孢子形态。

(5)担孢子。观察小麦腥黑穗病菌冬孢子萌发形成的担子及担孢子的形态