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结核杆菌生长现象观察、抗酸染色



录入时间:2011-7-12 14:45:07 来源:青岛海博

分枝杆菌生物学特性观察
 
材料
结核分枝杆菌的培养物
 
方法
观察结核分枝杆菌在改良罗氏培养基(含蛋黄、甘油、马铃薯和天门冬酰胺等)上的菌落特点:呈干燥颗粒状,乳白色或米黄色,形似花菜心。结核杆菌12~24h繁殖一代,3~4W形成菌落。
 
抗酸染色法
原理
分枝杆菌细胞壁含脂质较多,其中主要成分为分枝菌酸,此物具有抗酸性,染色时与石炭酸复红结合牢固,能抵抗酸性乙醇的脱色作用,因此抗酸菌能保持复红的颜色,达到染色目的。
 
材料
酒精灯、玻片、结核病人痰液、石碳酸复红、盐酸酒精、碱性美兰等
 
步骤
1.取开放性肺结核病人的痰液涂片,自然干燥后,通过火焰固定。
2.初染:痰膜上加一小的方形吸水纸,在吸水纸上滴加石炭酸复红染液,在火焰高处徐徐加温至冒蒸气,并维持 5 分钟(注意切勿让染液沸腾或煮干),当染液蒸发减少时,需再加染液补充。待标本片冷却后水洗。
3.用 3% 盐酸酒精脱色,至无红色染液流下为止(反复2~3次,一般需要1~2min)水洗。
4.复染:用碱性美蓝复染 1 分钟,水洗,吸干,镜检。抗酸杆菌呈红色,背景及非抗酸菌呈蓝色

 

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