材料
1、菌种:大肠杆菌、葡萄球菌
2、药敏纸片、接种环、镊子、酒精灯、培养箱等
原理
在已接种被测细菌的琼脂平板上,平贴含有一定量抗菌药物的药敏纸片,由于培养基中含大量的水分,所以抗菌药物很快溶解于培养基内,并向四周扩散,药物在琼脂中的浓度随离开纸片的距离增大而降低,当低于MIC时细菌则生长而形成抑菌环。
在药物浓度恰高于该药物对该菌的最低抑菌浓度的琼脂中,该细菌的生长就受到抑制,在药物浓度低于该药物对该菌的最低抑菌浓度的琼脂中,细菌能够生长。孵育后,在含药纸片的周围形成透明的抑菌环,量取该抑菌环的直径,可测得该细菌对相应药物的敏感度。
培养基:水解酪蛋白琼脂(M-H琼脂)
抑菌环的直径与最低抑菌浓度(MIC)呈负相关。
方法:
同连续划线接种法密集接种细菌(改良的K-B法)。
用无菌镊子夹取药敏制片,分别贴于平板上,各药敏纸片之间的距离应基本相等,一般每个平板贴四个药敏纸片。
37℃、培养24h后测定抑菌圈,作出结果判定。
敏感程度判断标准:<10mm---耐药;10-15mm----中度敏感;>15mm---敏感(非检验专业)
接种细菌的量(相当于1/2 0.5麦氏比浊管浓度,即0.75×108)。琼脂厚度为4mm土lmm (平板直径9cm)。m、红霉素15ml,抗生素含量(青霉素10m质量控制:培养基(M-H琼脂)、纸片性质与直径(吸水纸、直径6mm)
定量实验有:试管稀释法、E-试验
定性实验可指导临床医生使用什么药物,定量实验可指导临床医生该药物使用多少量,根据半衰期决定每天给几次药。
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