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菌种保存及培养



录入时间:2011-6-23 14:34:02 来源:青岛海博

 
一般用到大肠杆菌,金葡菌,黑曲霉,白色念珠球菌,生孢梭菌,枯草芽孢等,我们的目的是保藏一年,标准是买进时是第二、三代,使用时不超过第五代。
 
方法:普通冰箱0度一下冷藏。先把买回来的二代菌在相应的培养基中培养分离,观察菌落形态和做革兰氏染色,确定是我们所需要的菌后,再事先准备好半固体琼脂小管,接着用接种环挑取菌落穿刺接种于琼脂的斜面及高层,然后在覆盖上事先准备好的灭过菌并干燥过的液体石蜡,约1CM。就可以冷藏了,有效期一年。
 
一般是制备12支,然后要用时在取出一支活化后划线接种于琼脂斜面,培养24小时候,冷藏在冰箱里,有效期一月,这个制备4支。这样就能保证每周都有菌用了,使用时是第四代或第五代。
 
如果是第三代想用第四代的话,就可以把买回来的菌斜面跳过平板划线形态及革兰氏检查(正规渠道买的菌一般还是可靠的),直接做半固体穿刺接种以后用液体石蜡封起来后冷藏(多做几支)。使用时再活化后划线于营养琼脂斜面,培养24小时,这时就可以挑取菌落使用了(第四代),有效期一个月(这个斜面制备4支冷藏,那么就可以每周使用一支了)。也就是说石蜡管做了几支就可以用几个月,但最多是一年。

 

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