范围:本法适用于浓缩果汁及浊汁中细菌总数的检测。浓缩果汁通过滤膜过滤,细菌被截留,而后将滤膜置于细菌总数选择性培养基中,培养确定细菌总数的数量。浊汁直接与平板计数培养基混合后培养来确定细菌总数的数量。
参考:GB/T 4789.2-2003
标准:无
试剂:
Millipore细菌总数选择性培养基
平板计数琼脂
乙醇(75%)
仪器器皿:
培养箱
净化工作台
灭菌Duran Schott 瓶
10毫升无菌移液管
Millipore过滤器
PALL 0.45μm滤膜
PALL 一次性无菌培养皿50×9mm,内置吸水纸
一次性无菌培养皿90×15mm,塑料
真空泵
菌落计数器
镊子
酒精灯
漏斗
操作程序
全部工作应在已经紫外线杀菌15分钟及75%乙醇喷洒过的净化工作台上进行。
1清汁的检测
1.1用无菌移液管从无菌袋中吸取20mL果汁,置于盛有50mL灭菌水的样品瓶中,充分混匀。将一瓶细菌总数选择性培养基倒入50×9mm的一次性无菌培养皿内。
1.2用无菌镊子夹取一个滤膜边缘部分,正面向上置于灭菌过滤器上,将制备的样品倒入漏斗内,打开真空泵,当全部液体通过膜后,释放真空,用镊子把滤膜轻轻夹起,放于预备的培养皿内。
1.3将培养皿置于培养箱内,于30~35℃培养三天。
1.4全部的细菌总数用放大镜计数。此数目除以20即得出每毫升果汁中的细菌菌群数。
2浊汁的检测
2.1用无菌移液管吸取10mL已热处理过的果汁,分别备5个无菌培养皿内各加入2mL果汁,向每一90×15mm的无菌培养皿中迅速倾入平板计数琼脂约25mL,轻轻摇动,使果汁与培养基混合均匀。
2.2待培养基凝固后,将培养皿倒置放入培养箱内,于30-35℃培养三天。
2.3培养结束,进行计数,以每10mL样品报告结果。
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