一、采样及检查原则:
采样后必须尽快对标本进行相应指标的检测,送检时间不得超过6 h;若标本4 ℃保存时,送检时间可延长,但不得超过24 h。
1. 医务人员手的微生物学监测
(1)采样时间: 在接触患者或从事医疗活动前进行采样。
(2)采样面积及方法: 被检人五指并拢,将浸有无菌9g/L氯化钠溶液的棉拭子一支在双手曲面从指根到指端来回涂擦各两次(一只手涂擦面积约30cm2),并随之转动|检验地带网|采样棉拭子,剪去手接触部位,将棉拭子放入装有10ml采样液的试管内送检。采样面积按平方厘米cm2) 计算。
(3)细菌菌落总数检查: 1ml采样液放入灭菌平皿内,用普通营养琼脂作倾注培养,放35℃温箱内培养24~48 h计数菌落。
手细菌菌落总数(cfu/ cm2)= 平板上菌落数×采样液稀释倍数30×2
(4) 判断标准: 见表6-3-1。
2. 物体表面的微生物学监测
(1)采样时间:消毒处理后4 h内采样。
(2)采样面积: 被采表面<100 cm2, 取全部表面;被采表面≥100 cm2,取100 cm2。
(3)采样方法: 用5cm×5 cm的标准灭菌规格板,放在被检物体表面,用浸有灭菌9g/L氯化钠溶液的棉拭子1支,在规格板内横竖往返各涂抹5次,并随之转动棉拭子,连续采样式1~4个规格板面积,剪去手接触部分,将棉拭子入装10ml采样液的试管内送检。门把手等小型物体则采用棉拭子直接涂抹物体的方法采样。
(4)细菌菌落总数检查: 1ml采样液放入灭菌平皿内,用普通营养琼脂作倾注培养,放35℃温箱内培养24~48 h计数菌落。
物体表面细菌菌落总数(cfu/ cm2)= 平板上菌落数×采样液稀释倍数/采样面积(cm2)
(5)判断标准:见表6-3-1。
3. 空气的微生物学监测
(1) 采样时间: 选择消毒处理后与进行医疗活动之前期间采样。
(2) 采样高度: 与地面垂直高度80~150 cm。
(3) 布点方法: 室内面积≤30 m2,设一条对角线上取3点,即中心一点、两端各距墙1m处取一点; 室内面积>30 m2,设东、西、南、北、中5点,其中东、西、南、北点均距墙1m。
(4) 采样方法: 用90mm直径普通营养琼脂平板在采样点暴露5~30 min后送检培养。
(5) 细菌菌落总数检查:将平板置37℃温箱内培养24 h计数菌落。
空气细菌菌落总数(cfu/ m3)= 50000NAT
式中:A—平板面积 (cm2)
T—平板暴露时间 (min)
N—平均菌落数 (cfu/平板)
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