为进一步弄清玻片法对葡萄球菌血浆凝固酶试验鉴定的准确性,我们收集了玻片法结果阳性的葡萄球菌118株,按Kloos等[1]分类方法进行详细鉴定与分类,结果报告如下。
1 材料与方法
1.1 菌株来源 菌株分离于1996年8月~1997年12月我院住院及门诊患者各类标本中,计118株。标准菌株ATCC 25923由天坛生物制品检定所提供。
1.2 菌种鉴定方法 将经玻片法凝固酶试验鉴定的、经纯化培养后保存于琼脂斜面的“金葡菌”118株,传代培养,按照Kloos等[1]方法再鉴定。
2 结果
2.1 菌种鉴定结果 金黄色葡萄球菌23株,中间型葡萄球菌28株,表皮葡萄球菌19株,溶血葡萄球菌15株,里昂葡萄球菌9株,人葡萄球菌7株,耳葡萄球菌7株,华纳葡萄球菌3株,其余是腐生葡萄球菌和柯氏葡萄球菌7株,共10种。
2.2 玻片法凝固酶重复试验结果 在限时操作的10秒种内,呈阳性反应者,23株金黄色葡萄球菌中有22株,28株中间型葡萄球菌中有25株,阳性反应准确率为92.16%(47/51)。 2.3 菌种与样品来源关系的观察,见表1。
表1 不同临床标本葡萄球菌的分离情况
|
株数 |
标本来源 |
|
|
痰 |
伤口分泌物 |
耳分泌物 |
尿道分泌物 |
血液 |
尿液 |
其它 |
金黄色葡萄球菌 |
23 |
0 |
17 |
2 |
1 |
0 |
1 |
2 |
中间型葡萄球菌 |
28 |
2 |
10 |
7 |
1 |
1 |
7 |
0 |
表皮葡萄球菌 |
19 |
1 |
0 |
0 |
2 |
1 |
14 |
1 |
溶血葡萄球菌 |
15 |
8 |
1 |
0 |
1 |
1 |
2 |
2 |
里昂葡萄球菌 |
9 |
0 |
0 |
0 |
5 |
0 |
4 |
0 |
其它型葡萄球菌 |
24 |
0 |
0 |
0 |
8 |
1 |
15 |
0 |
合计 |
118 |
11 |
28 |
9 |
18 |
4 |
43 |
5 |
2.4 β-内酰胺酶测试结果 采用酸测定法。同时用大肠埃希菌ATCC 35218及金黄色葡萄球菌ATCC 25923为质控菌株。118株葡萄球菌中,产酶株有61株,占51.69%。在产酶株中,以中间型葡萄球菌产酶率最高,占85.71%(24/28)。
2.5 抗生素敏感试验结果 10种葡萄球菌对12种抗生素耐药性相差不大,除对万古霉素、丁胺卡那霉素以及加酶抑制剂的抗生素敏感外,对其余抗生素敏感性均较低。
3 讨论
为防止玻片法检测血浆凝固酶试验假阳性反应,必须严格按《全国临床检验操作规程》[2]进行操作,即在10秒内|检验地带网|完成此试验。本室以前将此实验延时1~2分钟观察,致使假阳性率高达56.78%(67/118)。同时,为防止假阳性反应,还必须做试管法血浆凝固酶试验,以免“游离”的凝固酶漏检。
凝固酶阳性的葡萄球菌可分为金黄色葡萄球菌、中间型葡萄球菌和家畜葡萄球菌。因此凝固酶试验阳性者不能定为金黄色葡萄球菌,必须再进行有关生化试验如耐热DNA酶、β-半乳糖苷酶,方可正确鉴定。
参考文献
1 Kloos W E,Lambe D W.Staphylococcus.In:Albert B.ed,Manual of Clinical microbiol.5 th ed.Washington:American society for microbol,1991.222
2 叶应妩,王毓三主编.全国临床检验操作规程.第二版.南京:东南大学出版社,1997.553~569
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