2.临床意义
HP有较强的鞭毛动力和对胃黏膜/黏液有较强的黏附力,使HP能在接近中性的黏膜层中定植,产生强活性的尿素酶,分解尿素,在菌体周围形成保护性氨环境,以抵抗胃黏膜上皮细胞分泌的胃酸;HP产生的蛋白酶能有效分解黏液蛋白,提供营养。
HP在胃内定植后,通过对胃黏膜上皮细胞的黏附性、胃肠激素的作用、细胞壁脂多糖中脂质A的致炎作用、产生多种酶(包括:尿素酶、蛋白酶、过氧化氢酶、脂酶和磷脂酶等)以及产生的细胞毒素等等,这些因素的共同作用导致临床疾病的发生。在临床上主要引起消化性溃疡(十二指肠溃疡、胃溃疡)、慢性活动性胃窦炎等,长期感染易发展为萎缩性胃炎、胃腺癌和胃黏膜淋巴组织淋巴瘤。
3.微生物学检验
(1)检验程序。
(2)标本采集多部位采集胃、十二指肠黏膜标本,标本要新鲜,保持湿润,置2ml无菌等渗盐水中保存,在运送途中不超过3h,在4℃下最多保存5h。流行病学调查和检测治疗效果时可取血清检查。
(3)检验方法
1)显微镜检查 ①直接镜检:取胃、十二指肠黏膜活检标本作革兰染色,在油镜下查找细长弯曲或呈海鸥展翅状排列的菌体;由于涂片是在HP定植部位的黏膜进行观察,阳性率很高,是简便、实用、准确和较快速的诊断方法;②组织学切片:可行Warthin-Starry银染色、改良Giemsa染色、甲苯胺蓝染色、石炭酸复红染色等。
2)分离培养 用含5%绵羊血的布氏琼脂或加入7%马血的心脑浸液作为非选择性培养基,用改良的Skirrow琼脂(加入万古霉素10mg/L、两性霉素B10mg/L、甲氧苄啶5mg/L)作为选择性培养基,在含5%O2、10%CO2、85%N2的微需氧环境中37℃孵育3~5天,长出细小、灰白色、半透明、不溶血的菌落。
3)快速检查 ①快速脲酶试验:取一小块新鲜活检标本置于含尿素的培养基中,由于幽门螺杆菌产生大量的细胞外尿素酶(相当于普通变形杆菌的20~70倍),可分解尿素产大量的氨,使培养基pH升高,指示剂变色,能在5min~30min内检测出幽门螺杆菌;这是一种简便实用、快速灵敏且较为准确的检测Hp方法,适合胃镜检查的病人;②核素标记试验:本试验的敏感性和特异性均很高,但操作起来稍繁琐;③PCR:是一种高度敏感和特异的方法,但由于实验条件要求较高,目前仅用于实验研究;④抗原检测:可用已有的商品化试剂盒,用ELISA法直接检测HP的菌体抗原。
4)鉴定 本菌的鉴定主要通过典型的菌体形态,生长缓慢,仅于37℃生长。氧化酶和触酶阳性,脲酶强阳性,对萘啶酸耐药,对头孢噻吩敏感,在1%甘油和1%胆盐中均不生长。具体生化特征见表13-2。
4.耐药性 HP对多粘菌素、三甲氧苄氨嘧啶、磺胺、万古霉素和萘啶酸天然耐药。在体外药敏试验中,HP对许多抗生素都很敏感,但体内用药效果并不满意,主要因为HP寄生在黏液层下的胃上皮细胞表面,抗生素不能渗入胃黏膜深层。临床上治疗HP的药物有阿莫西林、甲硝唑、克拉霉素、四环素、呋喃唑酮等。
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