链球菌苗培养基使用特点
1、链球菌苗生产培养基用途
羊链球菌病灭活疫苗
羊链球菌病活疫苗
猪链球菌病活疫苗
2、链球菌特点
形态:本菌为革兰氏阳性菌,寄生于动物呼吸道、肠道、黏膜等部位。链球菌呈圆形或者卵圆形,直径小于2.0um,常排列成链状或成双。
3、链球菌培养特点
培养和生物学特性:本菌大多为兼性厌氧菌少量为厌氧菌。最适pH在7.4~7.6,生长温度为35~37℃。普通培养基上不生长,在培养基中添入血液、血清、葡萄糖等,最好为缓冲体系培养基效果较好。
菌落特点:在含血液营养琼脂上生长,菌落直径0.1~1.0mm,灰白色,表面光滑,边缘整齐的小菌落。多数致病菌有溶血能力。
4、链球菌类疫苗生产工艺
生产用种子制备
一级种子繁殖和鉴定:将冻干菌种用马丁肉汤稀释,划线接种于含10%鲜血营养琼脂平板,放置37℃培养18-20小时,观察菌落特征,选择有明显溶血环的5-10个菌落混合接种于鲜血营养琼脂斜面若干管, 37℃培养24小时后,纯粹检查,合格后作为一级种子。
生产用种子制备
二级种子繁殖:取一级种子接种于缓冲肉汤中,同时加入0.2%葡萄糖和1-4%的裂解血球全血(或者血清),于37℃培养6-10小时,纯粹检验合格后,立即置2-8℃保存,使用期不超过2天。
生产用种子制备
疫苗的制备:取二级种子按照10-20%接种于温度为37 ℃链球菌生产培养基中,按照 0.2%葡萄糖和1-4%的裂解血球全血(或者血清) ,于36-37℃培养6-16,培养期间摇瓶2-3次,当菌液浑浊或者pH降至6.0时停止培养。
5、链球菌培养基技术要求
培养基pH7.4-7.6,培养基清亮无沉淀
效力检验用C74-63或者C74-37强毒株
生产用菌株ST171株
菌数应当达到每毫升30亿以上
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