致病性(致泻性)大肠埃希氏菌及其检验
Examination of diarrheogenic Escherichia coli

•        条件性致病菌(opportunistic pathogen)

•        致病性大肠埃希氏菌 是指能使人、动物(esp.婴儿和幼龄动物)感染及人食物中毒的一群大肠杆菌。

•        致病性大肠埃希氏菌属主要分为五大类：

1、产肠毒素大肠埃希氏菌(ETEC)                   2、肠道侵袭性大肠埃希氏菌(EIEC)

3、肠道致病性大肠埃希氏菌(EPEC)                 4、肠道出血性大肠埃希氏菌(EHEC)     O157:H7

5、肠粘附性大肠埃希氏菌(EAEC)

致病大肠埃希菌种类

菌株	侵袭部位	疾病与症状	致病机制
ETEC	小肠	旅行者腹泻、婴幼儿腹泻、水样便、腹痛等	LT、ST
EPEC	小肠	婴幼儿腹泻、水样便发热、呕吐	病菌黏附、破坏细胞
EIEC	结肠	志贺样腹泻，脓血便	黏附、内毒素破坏细胞
EHEC	结肠	出血性结肠炎等	志贺样毒素(VERO毒素)
EAEC	小肠	婴儿腹泻、水样便、脱水	黏附、毒素

 

•        致病性大肠杆菌与非致病性大肠杆菌在形态、培养特性及生化特性上是不能区别的，只有用血清学方法按抗原性质来区分。致病性大肠埃希氏菌的致病性是一个很复杂的问题，也并非由某一方面的因素所决定。

肠外感染：多为机会感染，表现为泌尿系感染(多见)，胆囊炎、腹膜炎等。

肠内感染：由致病大肠埃希菌引起，表现为腹泻。

一、生物学特性

1．形态与染色特性

菌体两端钝圆，中等大小，杆状(有时呈卵圆形)；1～3µm X 0.6µm；周生鞭毛，能运动；不产生荚膜，无芽孢；革兰氏阴性。有时两端着色较浓，要与巴氏杆菌区分开来。

2．培养特性

1)需氧及兼性厌氧菌

2)对营养要求不高，在普通琼脂上生长良好，在15～45℃范围内均可生长，最适生长温度37℃，最适pH为7.2～7.4。

3)在普通琼脂平板上可形成圆形、凸起、光滑、湿润、半透明、边缘整齐、中等大小的菌落。与沙门氏菌菌落较相似，但是，大肠杆菌菌落对光(45角折射)观察可见荧光。

4)在普通肉汤中18～24h均匀浑浊，而后底部出现粘性沉淀物，并伴有臭味。能形成菌膜。

5)部分菌落可出现β溶血。

6)远藤琼脂：带金属光泽的红色菌落

7)S．S琼脂：多不生长，少数生长的细菌，也因发酵乳糖产酸而形成红色菌落

8)伊红美兰(EMB)琼脂：紫黑色菌落，有的有金属光泽

9)麦康凯琼脂：菌落呈红色

3．生化特性

1)可发酵多种碳水化合物产酸产气，不典型菌株不发酵或迟缓发酵乳糖。2)对蔗糖，卫矛醇、水杨苷发酵结果不一致。3)大多数菌株对赖氨酸、精氨酸和鸟氨酸有脱羧基作用。4)不产生H2S，不液化明胶，不分解尿素。5)不能在氰化钾培养基上生长，靛基质试验阳性，V-P试验阴性，不利用枸橼酸盐。此为典型的大肠埃希氏菌特性。

IMViC试验： I：吲哚(靛基质)试验，  M：甲基红试验，Vi：V-P试验， C：枸橼酸盐利用试验

典型大肠杆菌IMViC试验为+、+、-、-。如IMViC试验为+、+、-、-，且乳糖发酵，表明被检物已有粪便污染，有发生肠道传染病的危险，这是卫生细菌中常用的检测指标。

 

表5—20  大肠杆菌的主要生化特性

注：+阳性；  －阴性；  d有不同的生化型；  +/-多数阳性，少数阴性； (+)/-多数迟缓阳性，少数阴性；  ×迟缓不规则阳性或阴性

 

4.血清学特性    大肠埃希氏菌的抗原构造主要由菌体抗原(O)，鞭毛抗原(H)和荚膜抗原(K)三部分组成。

1)O抗原  每一血清型只含有一种O抗原。本菌已发现有170种O抗原，分别以阿拉伯数字表示。

2)H抗原  一种大肠埃希氏菌只有一种H抗原，无鞭毛则无H抗原。H抗原共有64种。

3)K抗原  又称包膜抗原。共有103种。

•        新分离的大肠埃希氏菌70％具有K抗原。根据耐热性可把K抗原分为A、B、L三类，B抗原与L抗原均可在煮沸后被破坏，A抗原耐热性强，可耐受煮沸1小时而不被破坏。致病性大肠埃希氏菌的抗原主要为B抗原，少数为L抗原。

•        根据O抗原可将大肠埃希氏菌分成若干血清群，再根据K抗原和H抗原进一步分为若干个血清型或亚型。根据大肠埃希氏菌抗原的鉴定结果，写出其抗原式，如O111：K58(B)H12。一般认为H抗原与致病性无关，因此，一般不需要进行H抗原的鉴定。

5.抵抗力   抵抗力中等，各菌型之间存在差异。此菌对青霉素有中等抵抗力，对一般消毒剂都比较敏感。对氯尤为敏感，水中游离氯达到0.2 mg/L时，即可杀死此菌。此菌在土壤中、水中及粪便中可存活数月以上 。

6．毒素特性    有些大肠埃希氏菌产生肠毒素。

1)不耐热肠毒素(heat-labile enterotoxin，LT)：化学成分为蛋白质，分子量较大，具有免疫原性。60℃ 30分破坏。可引起肠道分泌增加，出现腹泻。

2)耐热肠毒素(heat-stable enterotoxin，ST)：分子量较小，无抗原性。100℃ 30分钟仍有活性。可引起肠分泌增加。