摘要: 目的 在实验基础上了解细菌在用芦荟替代蛋白胨、牛肉膏,血液成分制备培养基上的生长情况,分析芦荟在细菌培养中的作用和应用性价值。方法用常规方法制备普通营养琼脂培养基和血平板,再用一定量的芦荟源液替代普通营养琼脂中的蛋白胨、牛肉膏和血平板中的血液成分制备培养基,将一定量的细菌接种于含不同营养成分的培养基中培养,然后进行结果比较。结果致病性金黄色普通球菌,铜绿假单胞菌,大肠埃希氏菌均可在用芦荟替代蛋白胨、牛肉膏、血液成分的培养基中生长,且在一定时间内菌落直径均比普通营养琼脂中的菌落大。结论一定量的芦荟成分可替代蛋白胨、牛肉膏或血液成分制备培养基,进行体外细菌培养。
【关键词】芦荟 细菌培养基 蛋白胨 牛肉膏 血液成分营养琼脂
芦荟细菌芦荟作为民间用药,已有4000多年的历史,其疗效古今中外都得以确认,随着科技发展,国内外科学研究工作者在芦荟的成分分析,芦荟的应用性方面研究较多,而我们在芦荟对致病性金葡菌,大肠埃希氏菌,铜绿假单胞菌,四联球菌的体外生长实验中发现芦荟对微生物无直接杀灭或抑制作用,这对进一步了解芦荟的药用机理及保健机理起到了一定作用。
1材料和方法
1.1芦荟来源:元江芦荟(中国云南元江芦荟),美国芦荟(为美国库拉索芦荟)均来自我市林业科研所引进种植。细菌株来源:致病性金黄色葡萄球菌,大肠埃希氏菌,铜绿假单胞菌为我科室保存标准菌株,四联球菌从空气中获得.营养琼脂培养基为杭州天和微生物试剂公司产品。
1.2方法
1.2.1芦荟的处理:将2种芦荟用无菌蒸馏水洗净3次,在净化台上将芦荟的肉和皮分开,分别用无菌的小型粉碎机将其磨为浆状源液备用。
1.2.2培养基的配制:每瓶称取营养琼脂粉7.2g,加入200ml蒸馏水中溶解,共配9瓶营养琼脂培养基液,120~(2高压灭20rain,待冷至80c时加入芦荟(肉,皮)源液,加入元江芦荟肉20g的培养基为1号培养基,加入元江芦荟肉40g的培养基为2号培养基,加入元江芦荟皮20g的培养基为3号培养基,加入元江芦荟皮40g的培养基为4号,加入美国芦肉20g,40g的培养基为5,6号培养基,加入美国芦荟皮20g,40g的培养基为7,8号培养基,加入美国芦荟60g,5g的培养基为9,10号培养基,加入元江芦60g,5g的培养基为ll,l2号培养基,制备培养皿,每培养皿倒20ml培养基冷后备用。
1.2.3菌液配制:将四种细菌各挑取分纯菌落在无菌生理盐水中稀释混匀后与O.5个单位的麦氏比浊管一起在722分析仪上用53Ohm波长进行比浊,使其浊度的吸收值均为O.1,此时菌液的含菌量相当于5X10cfu/ml(此为1液)。取1液0.1ml+生理盐水4.9mlcfu/ml(此为2液),取2液0.1ml+生理盐水4.9ml稀释=2X10cfu/ml(此为3液),取3液0.1ml+生理盐水4.9ml稀释--4×10cfu/ml(此为4液)留稀释菌液4液(含菌量4X10cfu/m1)备用。
1.2.4接种培养:取四种细菌的稀释菌液(4X100cfu/m1)4液lOul接种于各自不同浓度和不同成分的芦荟培养基中,同时接种一个营养琼脂培养皿作对照,在37~(2恒温培养箱中培养18h)
说明用芦荟替代血液制备培养基培养细菌效果与血平板培养基一样,比普通营养琼脂;营养琼脂培养基效果好,试验结果表明,一定量的芦荟成分可用来替代蛋白胨、牛肉膏或血液成分制备培养基进行体外细菌培养,芦荟的有效成分对细菌的生长有一定的促进作用。由于芦荟含有8O多种化学成分,有15大药理作用,以及具有多种生理活性功能,因此目前芦荟及其制品已被广泛应用于医药美容、保健,食品等工业领域。但在微生物领域方面的应用还是空白,而我们从实验结果中发现芦荟的有效成分可用于体外细菌培养,且对GPc和GN细菌的生长都具有一定的促进作用,在元江芦荟与美国芦荟品种之问确无明显差异,若应用先进工艺生产芦荟干粉试剂,完整保留芦荟的有效成分,用来制备培养基进行体外细菌培养,对芦荟的开发研制具有十分重要的意义。
作者:张利军 夏云 温沙洛 张强 张家华 邹泽均 陈子祥
作者单位:攀枝花市妇幼保健院
参考文献
1张灿坤.王巍.芦荟开发研制的思路与方法.中国民族民间医药杂志.2000。44:169~170.
2吕佳.代云兰.传统芦荟的应用.中国民族民间医药杂志.2000.44:177~178.
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